色譜柱的發(fā)展,經(jīng)歷了從不定型硅膠到高純球型硅膠,、從低pH條件下不穩(wěn)定到穩(wěn)定的過程,。但硅膠在高pH條件下不穩(wěn)定的問題,始終沒有很好的解決方案,,直到雜化顆粒的誕生,。雜化顆粒集合了有機和無機填料的優(yōu)點,既具有純硅膠填料的高柱效,、高機械強度及保留穩(wěn)定性能,,又具有聚合物填料的寬pH范圍穩(wěn)定性和抑制硅醇基的酸性的特性,使其在堿性流動相中也能游刃有余,。
雜化顆粒色譜柱具有耐受堿性流動相的特點,,傳統(tǒng)C18硅膠顆粒色譜柱推薦的流動相pH為8,這是因為在高pH條件下,,硅膠填料開始溶解,,鍵合相也會水解(反應(yīng)機理為:在堿性條件下,OH-親核進攻硅膠基質(zhì),,發(fā)生親核取代反應(yīng),,導致硅膠溶解及鍵合相的水解),,導致柱效下降。而本產(chǎn)品因嵌入硅甲基,,親核取代反應(yīng)放緩,,顆粒表面溶解速度明顯放緩,故壽命大大延長,。
雜化顆粒的第二個優(yōu)點是對堿性分析物峰形的改善,。傳統(tǒng)的C18硅膠色譜柱在分析堿性化合物時,峰形有時候會很糟糕,,這是因為硅醇基與堿性化合物存在離子交換作用,,導致拖尾,雖然一些色譜柱采用封端這一方法來改善拖尾,,但是封端不可能*進行,,還是會有殘留硅醇基,拖尾在所難免,。而該產(chǎn)品在合成之時就引入硅甲基,,從根源上減少了硅醇基,所以雜化顆粒酸性的降低使其在寬pH范圍內(nèi)為堿性化合物帶來了對稱的峰形,。在方法開發(fā)的流動相pH優(yōu)化階段,,雜化顆粒色譜柱可為不同pKa值酸性和堿性的混合分析物的分離提供了更寬的選擇面。
雜化顆粒色譜柱利用色譜柱先將混合物分離,,然后利用檢測器依次檢測已分離出來的組分,。其直徑為數(shù)毫米,其中填充有固體吸附劑或液體溶劑,,所填充的吸附劑或溶劑稱為固定相,。與固定相相對應(yīng)的還有一個流動相,流動相是一種與樣品和固定相都不發(fā)生反應(yīng)的氣體,,一般為氮或氫氣,。
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