色譜是一種分離分析手段,,分離是核心,,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,,分析速度快等。GPC色譜柱由柱管,、壓帽,、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片),、接頭,、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,,壓力不高于70kg/cm2時(shí),,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,。為提高柱效,,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光,。
下面要為大家介紹GPC色譜柱的再生:
1,、正相柱再生。順次以正己烷,、異丙醇,、二氯甲烷、甲醇作流動(dòng)相沖洗色譜柱每步注意平衡溶劑的順序,,不要顛倒每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱的量為20-30倍柱體積(因異丙醇的粘度較大,,沖洗過(guò)程中請(qǐng)隨時(shí)注意調(diào)整沖洗的流速),用甲醇沖洗完后,,再以相反的順序沖洗色譜柱,。要注意上述溶劑必需嚴(yán)格脫水。
2,、反相柱的再生,。采用以甲醇:水=95:5(V/V),純甲醇,,二氯甲烷等溶劑作流動(dòng)相,,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱的量為20一30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。
3,、離子交換柱的再生,。長(zhǎng)時(shí)間在高pH值和高離子強(qiáng)度緩沖溶液中使用,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力降低,。用稀酸緩沖溶液沖洗,,可使陽(yáng)離子柱再生;反之,用稀堿緩沖溶液沖洗,,可使陰離子柱再生,。
流動(dòng)相使用前需用微孔濾膜過(guò)濾,消除流動(dòng)相中顆粒對(duì)色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞,。緩沖液與其他流動(dòng)相混合后應(yīng)重新過(guò)濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀,。不應(yīng)使用純水作為流動(dòng)相沖洗,以免柱性能損壞(添加5%的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱,,同時(shí)可以達(dá)到對(duì)緩沖鹽清洗的作用,。還可以使其更容易平衡)。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本色譜柱,。
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