高純硅因其優(yōu)良的機(jī)械強(qiáng)度和表面易改性等特征，已成為應(yīng)用廣泛的色譜柱填料,。高純硅膠色譜柱具有柱效高,、選擇性好及分析速度快等特點(diǎn)，因而被廣泛用于分離極性小分子如藥物,，而用于糖、肽或蛋白質(zhì)分離較少,。
高純硅膠色譜柱的在線結(jié)合目前主要有兩種方式：
一種是使用切換閥,，將萃取柱和色譜分析柱連接，讓色譜流動(dòng)相把萃取柱上富集的樣品全部轉(zhuǎn)移到色譜分析柱（直接方式）,。
另一種是間接方式,，采用和離線固相萃取一樣的凈化方式。樣品組分收集后,，用萃取儀內(nèi)置的進(jìn)樣器取10-20微升的組分注入色譜分析柱,。
二階在線固相萃取。它先采用間接方式的在線固相萃取作為一階段的樣品凈化,，組分經(jīng)過溶劑修飾后再通過直接在線固相萃取進(jìn)行富集,。這種二階在線固相萃取，先用一階去除大部分樣品的干擾物,。所使用的萃取柱和普通的離線固相萃取一樣,，可以是C18、離子交換,、石墨化炭黑,、親和色譜等類型。二階固相萃取的作用是富集和進(jìn)一步凈化,。因?yàn)闃悠芬呀?jīng)比較干凈,，二階壽命得以延長。
下面要為大家介紹的是高純硅膠色譜柱的操作方式：
1,、在條件允許情況下,，在使用前對(duì)按照說明書方法進(jìn)行柱效測試,。以確保色譜柱的正常。
2,、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃,。
3、樣品
將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中,。如果使用梯度洗脫,，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾,。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑，為達(dá)到較好峰形,，需要降低進(jìn)樣量,。
4、流動(dòng)相
所有流動(dòng)相,，特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動(dòng)相,，請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒有變化,，并確保流動(dòng)相沒有長菌。流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型,。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品,。
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