產(chǎn)品名稱：2×Fast Pfu Master Mix(Quick Load)
中文名稱：2倍快速Pfu梅預(yù)混液(Quick Load)

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品描述：本制品是將PCR反應(yīng)所需的Fast Pfu梅,、dNTPs,、MgCl2,、反應(yīng)緩沖夜以及優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,，預(yù)先配制成2倍濃度的混合物,。2×Fast Pfu Master Mix專為擴增克龍DNA片段優(yōu)化，高保真,，錯誤率僅為1.3×10-6,。使用時只需在加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應(yīng)，非常方便,。較普通Pfu梅,，2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高靈敏度,、抗干擾強等特點,，能獲得更理想的擴增結(jié)果， 并大幅度縮短擴增反應(yīng)時間,，非常適用于1-20kb長片段的擴增,。

產(chǎn)品特點：
高保真：具有同Pfu梅相同的保真度，為普通Taq酶的50倍,。
靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段,。
快速高效：Fast Pfu擴增速度為普通Pfu梅的數(shù)倍,，72℃保溫30 秒可延伸1kb以上，可在較短時間內(nèi)獲得高產(chǎn)量的PCR產(chǎn)物（圖例一）,。
快捷：PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,，數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。

產(chǎn)品用途：用于要求保真度比較高,，擴增長度較長的PCR反應(yīng),，包括克龍PCR、DNA片段拼接,、引入突變,、全基因合成等。

使用建議：（Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,，無3′端"A" 突出,，除使用環(huán)凱PCR一步定向克龍試劑盒（Cat. No: HKNR001） 外，其它PCR產(chǎn)物的克龍方案有：）
1)PCR前引物進行5′端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物麟酸化處理后再直接克龍于平滑末端的載體中,。
2)將產(chǎn)物3′末端加A后再與T載體連接,。
3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計引物時應(yīng)適當增加引物的長度,， 理想的引物長度為20-30mers,。另外為了減少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解，盡量在冰上配制反應(yīng)體系,。

應(yīng)用實例：圖例一）50μL 擴增體系中,，λDNA 為模板， 擴增 1kb~20kb 片段,。

泳道 M：λ/Hind III DNAMarker,；
泳道 1：1kb；
泳道 2：2kb,；
泳 道 3：4kb,；
泳 道 4：6kb；
泳道 5：8kb,；
泳道 6：10kb,；
泳道 7：12kb；
泳道 8：20kb,。

保存溫度：-20℃。

產(chǎn)品包裝（A 包裝）：

質(zhì)量保證：經(jīng)檢測無外源核酸酶殘留,；qPCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,；能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。

常用反應(yīng)體系（50μL）：

常用PCR 循環(huán)：

注意事項：
1)需溶解*后使用,，防止離子濃度不均勻,。
2)對高GC含量模板,，建議將變性溫度提高到98℃。
3)對于高GC模板,，建議配套使用PCR萬neng增強劑 I（Cat.No: HKE055）或者添加終濃度為5%-8% DMSO,。