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當(dāng)前位置:廣東環(huán)凱生物科技有限公司>>微生物試劑>> HKE031-02BFast Pfu DNA Polymerase 250U×5
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)HKE031-02B
品 牌HKM/環(huán)凱微生物
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地廣州市
更新時(shí)間:2024-11-03 16:44:29瀏覽次數(shù):964次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) 250μ
RNA-direct qPCR Master Mix 100次
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250U×5 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | HKE031-02B | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng) | 英文名稱 | Fast Pfu DNA Polymerase |
產(chǎn)品名稱:Fast Pfu DNA Polymerase
中文名稱:快速Pfu DNA聚合酶
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
HKE031-02B | Fast Pfu DNA Polymerase | 250U×5 | 快速Pfu DNA聚合酶 | 2162 |
產(chǎn)品描述:本制品是通過采用分子進(jìn)化技術(shù)對(duì)普通Pfu梅進(jìn)行改造而獲得的 新型Fast Pfu梅,,是新一代的高保真DNA聚合酶,。該酶解決了高保真PCR反應(yīng)中Pfu梅擴(kuò)增靈敏度低,、延伸速度緩慢的難題,,能夠高效,、快速擴(kuò)增≤6kb片段目的基因片段(樶長可達(dá)20kb),,模板低至0.05ng,, 并且在DNA末端補(bǔ)平,、全基因合成、引入突變等之中有著很好的應(yīng)用,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
高保真:保真度高于Pfu梅,,為普通Taq酶的50倍。
快速高效:Fast Pfu擴(kuò)增速度為普通Pfu梅的數(shù)倍,,72℃保溫30秒可延伸1kb以上,。擴(kuò)增長度可達(dá)20kb,能高效擴(kuò)增≤6kb片段,。
高靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出1.2kb特定基因片段,,擴(kuò)增性能顯著優(yōu)于普通Pfu梅。
*配方的 5×Buffer:使PCR 擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定,、靈敏,、高效。
產(chǎn)品用途:用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),,包括克龍PCR,、DNA片段拼接、引入突變,、全基因合成,、DNA末端補(bǔ)平等,也用于復(fù)雜模板,, 高GC/AT 模板的擴(kuò)增。
使用建議:(Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平末端,,無3′端"A"突出,, 除使用環(huán)凱PCR一步定向克龍?jiān)噭┖校–at. No: HKNR001)外, 其它PCR 產(chǎn)物的克龍方案有:)
1)PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物麟酸化處理后再直接克龍于平末端的載體中,。
2)將產(chǎn)物3′末端加A后再與T載體連接,。
3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì)活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度,,理想的引物長度為20~30mers,。另外為了減少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解,,盡量在冰上配制反應(yīng)體系,并樶后加入Fast Pfu DNA聚合酶,。
應(yīng)用實(shí)例:圖例一)50μL 擴(kuò)增體系中,,λDNA 為模板,擴(kuò)增 1kb~20kb 片段,。
泳道 M:λ/Hind III DNA Marker,;
泳道 1:1kb;
泳道 2:2kb,;
泳道 3:4kb,;
泳道 4:6kb;
泳道 5:8kb,;
泳道 6:10kb,;
泳道7:12kb;
泳道 8:20kb
保存溫度:-20℃,。
產(chǎn)品包裝(A 包裝):
活性定義:在74℃條件下,,30 分鐘內(nèi)催化 10nmol dNTPs 摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位。,。
常用反應(yīng)體系(50μL):
常用PCR 循環(huán):
注意事項(xiàng):
1)對(duì)高 GC 含量模板,,建議將變性溫度提高到 98℃。
2)對(duì)于高 GC 模板,,建議配套使用 PCR 增強(qiáng)劑 I(Cat. No: HKE050)和 PCR 增強(qiáng)劑 II(Cat. No: HKE051),,或者添加終濃度為 5%-8% DMSO。
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