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4,，所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣,？
（1）檢測抗原? zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法,。但競爭法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,，特別是檢測微生物的抗原，因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,，這對于某些抗原是很難做到的,，甚至是不可能的。另外在競爭法中,，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)，可影響ELISA的結(jié)果,。
（2）檢測抗體? 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,，這個方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.,。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體，接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體,。間接ELISA在檢測IgG時(shí)比較簡單,，但不適用于檢測其他種類的抗體，因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原,。
樣品采集：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。
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