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本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）水平,。用純化的人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ（FcαRⅠ/CD89）,，再與HRP標記的免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）濃度,。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）去除顆粒,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。

5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

試劑盒組成：

1	20倍濃縮洗滌液	30ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標試劑	6ml×1瓶	8	標準品（180 ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標包被板	12孔×8條	9	標準品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	中英文雙版說明書	1份
5	顯色劑B液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑A液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個

注意事項：：

上海研謹生物科技有限公司

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