牛偽狂犬病抗原（PRV Ag）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）實(shí)驗(yàn)原理

本試劑僅供研究使用       目的：本試劑盒用于測(cè)定牛血清,，血漿及相關(guān)液體樣本中偽狂犬病抗原（PRV Ag）水平。

實(shí)驗(yàn)原理：

  本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定標(biāo)本中牛偽狂犬病抗原（PRV Ag）,。用純化的偽狂犬病抗原（PRV Ag）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，可與樣品中偽狂犬病抗原（PRV Ag）相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的偽狂犬病抗原（PRV Ag）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中牛偽狂犬病抗原（PRV Ag）的存在與否。

試劑盒組成：

結(jié)果判定：

  試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10

  臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為偽狂犬病抗原（PRV Ag）陰性

  陽(yáng)性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為偽狂犬病抗原（PRV Ag）陽(yáng)性

注意事項(xiàng)

1．操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4．  封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

5．底物請(qǐng)避光保存。

6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),，參考波長(zhǎng)為630nm

7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,，使用時(shí)必須注意安全,。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個(gè)月