牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)實驗原理
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定牛血清,,血漿及相關液體樣本中偽狂犬病抗原(PRV Ag)水平。
實驗原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag),。用純化的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,可與樣品中偽狂犬病抗原(PRV Ag)相結(jié)合,,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)的存在與否,。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
陰性對照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
陽性對照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
結(jié)果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陽性
注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行,,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,,使用雙波長檢測時,,參考波長為630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸,,使用時必須注意安全。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個月