小鼠顆粒酶A elisa

Mouse granzymes A,Gzms-A ELISAKit

ELISA原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn):在應(yīng)用ELISA時(shí),，首先要清楚下面內(nèi)容：

1，是檢測(cè)抗體還是抗原,？

2,，檢測(cè)的結(jié)果是定性還是定量？

3,，是否需要檢測(cè)特異抗體的類(lèi)型,？

4,，所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣？
（1）檢測(cè)抗原? zui常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法,，其次是競(jìng)爭(zhēng)法,。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難，特別是檢測(cè)微生物的抗原,，因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,，這對(duì)于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的,。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中,，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),，可影響ELISA的結(jié)果,。
（2）檢測(cè)抗體? 檢測(cè)抗體種類(lèi)常用的方法是檢測(cè)抗體種類(lèi)的捕獲法，這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG,、IgA和IgM.,。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類(lèi)的抗體，接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體,。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單,，但不適用于檢測(cè)其他種類(lèi)的抗體，因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原,。
樣品采集：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),，-20℃可保存1個(gè)月,。-70度可保存6個(gè)月,。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。
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