產品名稱:大鼠血管緊張素1型受體抗體(AT1R Ab)elisa試劑盒
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中大鼠血管緊張素 1型受體抗體 (AT1R Ab)水平。用純化的大鼠血管緊張素 1型受體抗原包被微孔板,,制成固相抗原,,往包被單抗的微孔中依次加入血管緊張素 1型受體抗體 (AT1R Ab),再與 HRP標記的血管緊張素 1型受體抗原結合,,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的血管緊張素 1型受體抗體(AT1R Ab)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),,通過標準曲線計算樣品中大鼠血管緊張素 1型受體抗體 (AT1R Ab)濃度,。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收
集上清,,保存過程中如出現沉淀,應再次離心,。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心
20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應該再
次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,,保存
過程中如有沉淀形成,,應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000
轉/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,
細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心
20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次
離心
5. 組織標本:切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保
存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻
漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。分裝后
一份待檢測,其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬
上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
檢測范圍:
3ng/L -150 ng/L
保存條件及有效期:
1 2-8℃。
2 6個月