規(guī)格：原裝/96T ELISA試劑盒 分裝 48T/96T ELISA試劑盒

實驗原理：

案例分析：人E選擇素（E-Select in）

   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人E選擇素（E-Selectin）水平。用純化的人E選擇素（E-Selectin）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入E選擇素（E-Selectin）,，再與HRP標記的E選擇素（E-Selectin）抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的E選擇素（E-Selectin）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中人E選擇素（E-Selectin）濃度。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）去除顆粒。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒組成：

注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5． 嚴格按說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

6．本試劑不同批號組分不得混用,。

7．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。

9．底物請避光保存。

安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物,。如不小心接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3． 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份,。

4   Elisa試劑盒請遠離兒童

自備物品：

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 ,、 標準規(guī)格酶標儀

3 ,、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 ,、 一次性試管

6 ,、 吸水紙

保存條件及有效期：

1．試劑盒保存：；2-8℃,。

2．有效期：6個月

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