規(guī)格：原裝/96T ELISA試劑盒 分裝 48T/96T ELISA試劑盒

實驗原理：

案例分析：人17-α-羥化酶（（17-α-OH）

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人17-α-羥化酶（（17-α-OH）水平,。用純化的人17-α-羥化酶（（17-α-OH）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入17-α-羥化酶（（17-α-OH）,，再與HRP標記的17-α-羥化酶（（17-α-OH）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的17-α-羥化酶（（17-α-OH）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人17-α-羥化酶（（17-α-OH）濃度,。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現沉淀,，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管,。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）去除顆粒,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。

5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

試劑盒組成：

注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存,。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果,。

3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,，如標本數量多，推薦使用排槍加樣,。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔OD值的）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 嚴格按說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

6．本試劑不同批號組分不得混用,。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．底物請避光保存,。

安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物,。如不小心接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。
2． 實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份,。

4   Elisa試劑盒請遠離兒童

自備物品：

1 ,、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規(guī)格酶標儀

3 ,、 精密移液器及一次性吸頭

4 ,、 蒸餾水

5 ,、 一次性試管

6 、 吸水紙

保存條件及有效期：

1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

2．有效期：6個月

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