產(chǎn)品簡介:
胰蛋白酶溶液(0.25%)
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,,形成胰蛋白酶,。胰蛋白酶的特點在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,,這種過程即自動催化,。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽,,進而分解為氨基酸,,其最適溫度約為37℃。Trypsin solution(0.25%)主要由 0.25%胰酶組成,不含 EDTA,,經(jīng)過濾除菌,。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化,,通常室溫下1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞,。
產(chǎn)品組成:
Trypsin solution(0.25%) 100ml -20℃
自備材料:
1、 PBS,、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
2,、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考):
1,、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,,用無菌PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,,以去除殘余的血清,。
②加入少量Trypsin solution,略蓋過細胞即可,,室溫放置 0.5~2min,,不同的
細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,,細胞明顯收縮,,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,,吸除胰酶細胞消化液,。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,,即可直接用于后續(xù)實驗,。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入Trypsin solution重新消化,。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來,。1000~2000g離心1min,沉淀細胞,,盡量去除胰酶細胞消化液后,,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗,。
2,、組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大,,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項:
1,、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),,以免失效。
2,、在Trypsin solution 過程中,,要特別注意避免消化液被細菌污染。
3,、Trypsin solution 消化細胞時間不宜過長,,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個月有效,。