貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | CAS號 | 產(chǎn)品特征 |
Js10129-1ku | T4 DNA連接酶 | T4 DNA Ligase | 9015-85-4 | BR |
Js10128-1000u | T4 RNA連接酶 | T4 RNA Ligase |
| BR,，10u/ul |
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T4 DNA連接酶—BR
英文名： T4 DNA Ligase
別名：
CAS號： 9015-85-4
MDL： MFCD00163508
T4 DNA連接酶常用于催化雙鏈DNA平末端或互補(bǔ)粘性末端之間的連接反應(yīng),，也能催化雙鏈RNA 5´ -磷酸末端和3´ -羥基末端間的連接,。還可以修復(fù)雙鏈DNA,、RNA或DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口,。以上反應(yīng)均需消耗ATP,。 隨酶附帶10×T4 DNA Ligation Buffer及*配方的2×Quick Ligation Buffer提供給您更多的選擇：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,，16℃過夜連接可獲得最高的連接效率；使用快連Buffer在室 溫(25℃)下,，僅需5分鐘即可完成粘性末端或平滑末端DNA的片段的連接反應(yīng),。
使用建議：粘末端的連接反應(yīng)：插入片段和載體的摩爾濃度比特別重要，此比例在2-6之間為好,，低于2:1就會導(dǎo)致較低的連接效率,，高于6:1則會導(dǎo)致多個(gè)插入。摩爾比請按載體與插入片段DNA濃度及分子大小來計(jì)算,。
平滑末端的連接反應(yīng)：平滑末端的連接反應(yīng)與突出末端相比反應(yīng)較慢(其Km值約為突出末端的100倍),。進(jìn)行平滑末端的連接反應(yīng)時(shí)，可提高DNA濃度,，將使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右,。 向粘粒或噬菌體進(jìn)行連接反應(yīng)：可使載體和插入DNA的摩爾比調(diào)整為1:1,，同時(shí)增大DNA濃度以便取得良好效果,。(0.05～0.1μg／μl以上)
反應(yīng)溫度： 該酶的最適溫度為37℃，由于熱穩(wěn)定性較差,，因此 長時(shí)間反應(yīng)時(shí)通常需在16℃下進(jìn)行。若反應(yīng)1-2小時(shí)左右的話也可在室溫下進(jìn)行反應(yīng),。
抑制劑：T4 DNA連接酶要求Mg2+,，因此螯合Mg2+的EDTA的存在會阻礙反應(yīng)。將溶解于含有高濃度EDTA緩沖液中的DNA準(zhǔn)備作為樣品使用 ,，先用滅菌蒸餾水或TE緩沖液進(jìn)行置換,。
儲存條件： -20℃
用途： DNA的片段和載體DNA的連接
【質(zhì)量承諾】: 非人為造成的產(chǎn)品質(zhì)量問題，視具體情況,，我司負(fù)責(zé)退貨換貨,。
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