貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | CAS號 | 產(chǎn)品特征 |
Js14031-100g | 葡聚糖凝膠G-25 | Sephadex G-25 | 9041-35-4 | 分離:肽及球形蛋白質(zhì):1000~5000,;葡聚糖(線性分子):100~5000 |
Js14031-25g | 葡聚糖凝膠G-25 | Sephadex G-25 | 9041-35-4 | 分離:肽及球形蛋白質(zhì):1000~5000,;葡聚糖(線性分子):100~5000 |
Js14031-500g | 葡聚糖凝膠G-25 | Sephadex G-25 | 9041-35-4 | 分離:肽及球形蛋白質(zhì):1000~5000,;葡聚糖(線性分子):100~5000 |
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英文名: Sephadex G-25
別名: 交聯(lián)葡聚糖凝膠G-25
CAS號: 9041-35-4
此說明僅限參考
葡聚糖凝膠 G 系列使用說明
1化學和物理性質(zhì)
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹,。親水基質(zhì)使其非特異性吸附最小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率,。G 型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響,。
葡聚糖凝膠有不同的粒度,。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要*分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,,可在較低的壓力下獲得較高的流速,。另外, 粗級也可用于批量工藝,。
2產(chǎn)品說明
產(chǎn) 品 名 稱 分離范圍(球蛋白) 應 用
葡聚糖凝膠 G-10 <700 緩沖液交換,、脫鹽,分離小分子,,去除小分子
葡聚糖凝膠 G-15 <1500 緩沖液交換,、脫鹽,分離小分子,,去除小分子
葡聚糖凝膠 G-25 1000-5000 工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液
葡聚糖凝膠 G-50 1000-30000 多肽分離,、脫鹽、清洗生物提取液,、分子量測定
葡聚糖凝膠 G-75 2000-70000 蛋白分離純化,、分子量測定、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-100 2000-120000 蛋白分離純化,、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-150 5000-300000 蛋白分離純化、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-200 5000-600000 蛋白分離純化,、分子量測定、平衡常數(shù)測定
3使用方法
葡聚糖凝膠 G 系列產(chǎn)品以干粉形式存在,,使用前必須溶脹,,在膨脹期間應避免過度攪拌,因為它可能破壞填料,,不要使用磁力攪拌器,。
3.1填料的準備
(1)將填料在過量去離子水或緩沖液中,室溫條件下膨脹 3 小時,,或用熱水膨脹 1 小時,。洗脫緩沖液不應含有高粘度的試劑,。溶脹過程中,如果上層有碎膠,,請去除,。
(2)將溶脹好的填料,,所有的緩沖液等材料平衡至實驗操作溫度,。
3.2裝柱
(1)檢查層析柱所有部件,特別是過濾網(wǎng),,密封圈,,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整,。
(2)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),,務 必使底端無氣泡。
(3)用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),,注意勿使產(chǎn)生氣泡,。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,,連結(jié)好柱子頂端柱頭,。
(4)打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的 1.33 倍的流速流過,,使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過填料最大耐壓),。
3.3平衡
上樣前平衡層析柱至少 5-10 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的 PH 值和等電點等于上柱的Buffer 的PH 值和等電點)。
3.4上樣
樣品一定要離心或過濾后(0.45um)上樣,。
凝膠過濾的上樣量一般為不大于 5%的柱床體積,,我們建議初次上樣控制在1-2%的柱床體積,視分離情況可以調(diào)整,;脫鹽時上樣量可以達到 20%的柱床體積,,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高過高的凝膠層會引起較大的反壓,,應當盡可能避免,。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為 5:1 即可,。
3.5洗脫方法
可以用無鹽水,,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化,。
3.8 在位清洗(CIP)
凝膠使用十次后作一次 CIP,,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用 0.1 M 氫氧化鈉洗四個柱體積,,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生,。
注意事項:
1.上樣之前,,樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素,否則雜質(zhì)及色素會被吸附到填料上,,影響填料的正常使用,。
2.在使用過程中,避免使用高濃度的強酸強堿,,酸和堿的濃度應低于 0.15 摩爾,。堿會使流速變慢。
3.不同的樣品,,吸附和洗脫方法不相同,,可以根據(jù)相關的文獻進行。