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當(dāng)前位置:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司>>酶聯(lián)免疫試劑盒(種屬)>>大鼠ELISA試劑盒>> 48T/96T大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)

大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)

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產(chǎn)品型號(hào)48T/96T

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所在地上海市

更新時(shí)間:2024-12-29 08:43:38瀏覽次數(shù):1121次

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實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠褪黑素 (melatonin)水平。用純化的大鼠褪黑素 (melatonin)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入褪黑素(melatonin),再與 HRP標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合,,形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的褪黑素 (melatonin)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度( OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠褪黑素 (melatonin)濃度,。

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收

集上清,,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再

次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存

過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000

轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,

細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次

離心
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保

存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻

漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后

一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬

上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。

檢測(cè)范圍:

1 ng/L -40 ng/L

保存條件及有效期:
1     2-8℃。
2     6個(gè)月

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