產(chǎn)品名稱: 肥大細(xì)胞生長因子MGF ELISA試劑盒

保存與運(yùn)輸：短期2-8℃

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨供應(yīng)

一,、標(biāo)本的收集和保存

      用于ELISA測定的標(biāo)本zui為常用的是血清（漿）,，有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測目的,，也用到唾液、腦脊液,、尿液,、糞便等標(biāo)本。使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體,、腫瘤標(biāo)志物,、激素、特種蛋白,、細(xì)胞因子和治療藥物等,。對(duì)用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測定結(jié)果產(chǎn)生影響,。如可的松在早晨4～6點(diǎn)之間,，會(huì)有一峰值出現(xiàn)：生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發(fā)性方式釋放,，因此,，在測定此類激素時(shí)，有必要在密切相連的時(shí)間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,，以其中間值為測定值,。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r(shí)，血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高,。再如治療藥物的檢測,，應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的zui適時(shí)間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體,、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時(shí)間和體位方面的影響,，只是在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面：

（1）要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),，其有類似過氧化物的活性,，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色,。

（2）樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,，一則細(xì)菌的生長，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用,；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾,。

（3）血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周,，如為有菌操作,，則建議冰凍保存,。樣本的長時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下,。

（4）冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融,。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果,。此外,，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振蕩,，反復(fù)顛倒混勻即可,。

（5）標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測,。

二,、試劑準(zhǔn)備

      在實(shí)驗(yàn)室，對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意,，通常的做法是,，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題,，其直接的后果是對(duì)一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性,。因此在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是，在實(shí)驗(yàn)開始前,，將試劑盒先從冰箱中拿出來,，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測定,，以使試劑盒在使用前與室溫平衡,。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,，以滿足測定要求。

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