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大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)48T/96T

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2024-12-25 16:17:30瀏覽次數(shù):621次

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實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF)水平,。用純化的大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF),,再與 HRP標(biāo)記的神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF)抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度( OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)濃度,。

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收

集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再

次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存

過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000

轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,

細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次

離心
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保

存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻

漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后

一份待檢測(cè),其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬

上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

檢測(cè)范圍:

10ng/L -400ng/L

保存條件及有效期:
1     2-8℃。
2     6個(gè)月

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