實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人原鈣黏素1(PCDH1)水平,。用純化的人原鈣黏素1(PCDH1)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入原鈣黏素1(PCDH1),,再與HRP標(biāo)記的原鈣黏素1(PCDH1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的原鈣黏素1(PCDH1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人原鈣黏素1(PCDH1)含量,。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
檢測范圍:
10 ng/L -200 ng/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃,。
2.有效期:6個月
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒 |
人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒 |
人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 |
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 |
人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 |
人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 |
人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 |
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒 |
人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒 |