實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠脂聯(lián)素( ADP)水平,。用純化的大鼠脂聯(lián)素
(ADP)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入脂聯(lián)素( ADP)
,再與 HRP標(biāo)記的脂聯(lián)素( ADP)抗體結(jié)合,,形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過徹
底洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的脂聯(lián)素( ADP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長
下測定吸光度(OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠脂聯(lián)素( ADP)濃度,。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后
如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時間
控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD
值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)( n倍)后再測定
,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) .
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
檢測范圍:
5μg/L -100μg/L
保存條件及有效期:
1 2-8℃,。
2 6個月