ELISA分析儀器

    ELISA試劑技術(shù)20世紀(jì)80年代引入中國,，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用,。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展,，我國先后出現(xiàn)了十余家酶標(biāo)儀,、洗板機(jī)生產(chǎn)廠商,，在中國市場上與眾多的進(jìn)口酶標(biāo)儀器進(jìn)行緊張競爭,。下面分三個方面對ELISA中有關(guān)儀器及其在中國的應(yīng)用作一簡要介紹,。

    分離式酶聯(lián)免疫儀器

    分離式酶聯(lián)免疫儀器主要有酶標(biāo)儀、洗板機(jī),。在血清離心之后,，經(jīng)過加樣,、洗板、孵育等過程,，zui后通過吸光度判定結(jié)果,。ELISA實(shí)驗(yàn)在國內(nèi)主要用于定性檢驗(yàn)，故目前的分離式儀器基本上可以滿足,。

    酶標(biāo)儀本質(zhì)上是一臺于微孔板的,、可見光范圍的光電比色計。在ELISA實(shí)驗(yàn)中,，酶標(biāo)儀是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guān)鍵儀器,，對試驗(yàn)結(jié)果的判定有直接影響，是實(shí)驗(yàn)室*的重要儀器之一,。隨著ELISA技術(shù)的普及,，酶標(biāo)儀得到了很大發(fā)展，產(chǎn)品種類齊全,，型號多樣,，各有特色。目前國內(nèi)市場上銷售的酶標(biāo)儀已*擺脫原來的單孔測量方式,，整板測量,、定性定量計算、存儲,、多種報告格式,、濾光片自動轉(zhuǎn)換等已成為基本的、*的功能,，各種新推出的酶標(biāo)儀性能日益完善,，功能不斷擴(kuò)充。具體有：

（1）   測量高速化 從目前不斷推出的酶標(biāo)儀趨勢來看,，整板測量速度均在10s以內(nèi),，這有利于防止測量過程中各微孔吸光度的微小變化，盡可能克服環(huán)境對結(jié)果的影響,，同時可以滿足動力測量的要求,，測量速度在20s以上的儀器將處于不利于地位。我國現(xiàn)生產(chǎn)的酶標(biāo)儀,，測量整板速度一般為25s,產(chǎn)品更新周期較長,。

（2）   寬吸光度范圍  盡管酶標(biāo)儀A=0-2.5的吸光度范圍*可以滿足實(shí)驗(yàn)的要求，但國外新推出的儀器都擴(kuò)寬了早期型號的吸光度范圍,，較的酶標(biāo)儀其線性范圍可以達(dá)到A=4.0,，并且保持很好的精密度，如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm,、A=0-4.0時其重復(fù)性與線性均不大于3.5%,。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數(shù)范圍達(dá)A=0-4.0,，在A=3.0-4.0范圍，其線性不超過2%, RSD小于1.0%,。

（3）   擴(kuò)展到紫外 增加紫外濾光片幾乎是廠商的共同選擇,。由于各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的機(jī)構(gòu)，可以同時安裝6-8片濾光片,，擴(kuò)展紫外功能相對容易,，一般都增加340nm濾光片。

（4）   具有孵育功能 可以自動,、控制反應(yīng)溫度，使微孔板的孵育過程在儀器內(nèi)部完成,，降低外界干擾,，簡化操作步驟。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等,。

（5）   具有動力學(xué)檢測功能   常規(guī)ELISA是一種終點(diǎn)法測量實(shí)驗(yàn),，測量前需要加入終止液來抑制酶免反應(yīng)的進(jìn)行，通過吸光度的大小來計算待測物質(zhì)的濃度,，動力學(xué)方法是通過測定反應(yīng)過程中吸光度的變化速率來計算相應(yīng)的待測物質(zhì)的含量的,，酶標(biāo)儀的測量速度加快后，只要增加相應(yīng)的軟件,，就可以使用酶標(biāo)儀完成某些生化指標(biāo)的動力學(xué)測量,。

洗板機(jī)是ELISA試驗(yàn)保證洗滌效果、進(jìn)而保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的重要儀器,，洗板機(jī)的作用已不再是簡單的代替人的手工勞動的自動化裝置,。目前國內(nèi)的洗板機(jī)除提供常規(guī)的設(shè)備清洗次數(shù)、清洗條數(shù),、浸泡時間等基本功能之外,，還根據(jù)用戶的需要分別增加了底部沖洗、兩點(diǎn)吸液,、板式/條式洗板,、震蕩、位置調(diào)節(jié)及自動清洗管路,、自動換液存儲多種洗板程序等功能,，清洗殘留量由原來的5-6UL/孔減小到2UL/孔，有的洗板機(jī)允許用戶對洗板過程的每一步的流量,、時間,、位置等進(jìn)行詳盡的設(shè)定。生產(chǎn)廠商根據(jù)各自對洗板技術(shù)的研究,，努力提高儀器可靠性與自動化程度,，同時為用戶提供一個*的,、完善的洗滌環(huán)境。國內(nèi)洗板機(jī)就洗板效果,、產(chǎn)品可靠性等主要指標(biāo)已達(dá)到進(jìn)口以前的水平,，與進(jìn)口儀器相比，其價格,、售后服務(wù)占一定優(yōu)勢,，主要差距是無定量加液。

組合式的酶聯(lián)免疫儀器

 組合式的酶聯(lián)免疫儀器分三類：全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng),、自動樣品處理系統(tǒng),、流水線作業(yè)式組合系統(tǒng)。前兩者主要用于各大血站,、醫(yī)院,，后者主要用于試劑生產(chǎn)廠商。

全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)是將ELISA試驗(yàn)中的各個步驟,，從加樣,、孵育、洗滌,、震蕩,、閉塞到定性或定量分析、報告存儲與打印功能全部集成在一臺儀器中,，由儀器按用戶事先設(shè)計的程序自動進(jìn)行,。HAMILTON公司的FAME(世界上*臺自動板式ELISA系統(tǒng))、BIORAD公司的CAA,、奧斯邦公司的AMP,、TECAN公司的Minilyser、ORGANO公司的TEKTIME,、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)已先后進(jìn)入國內(nèi)市場,。近兩年新進(jìn)入中國市場還有DYNDRX、公司的DSX,、 阿克蘇公司的Flextk2,、BIOASIA代理的TRITURUS等。全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)的出現(xiàn)滿足了各大醫(yī)院,、血站大批量重復(fù)檢驗(yàn)的要求,，提高了這些單位的檢查檢驗(yàn)效率與實(shí)驗(yàn)水平，有效控制了大批量檢驗(yàn)中極有可能出現(xiàn)的人工操作失誤,，有利于ELISA實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量保證與提高,，其國內(nèi)市場穩(wěn)步增長。

自動樣品處理系統(tǒng)主要用于完成ELISA實(shí)驗(yàn)中的繁瑣無味,、人工容易出錯的加樣,、稀釋滴定,、孵育、洗滌等步驟,，完成之后再由酶標(biāo)儀判定結(jié)果,。使用自動樣品處理系統(tǒng)利用原有的酶標(biāo)儀，既節(jié)約資金,，又實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)過程的自動化,，是一種很經(jīng)濟(jì)的方案。