ELISA分析儀器

    ELISA試劑技術(shù)20世紀(jì)80年代引入中國，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用,。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展，我國先后出現(xiàn)了十余家酶標(biāo)儀,、洗板機生產(chǎn)廠商,，在中國市場上與眾多的進(jìn)口酶標(biāo)儀器進(jìn)行緊張競爭。下面分三個方面對ELISA中有關(guān)儀器及其在中國的應(yīng)用作一簡要介紹,。

    分離式酶聯(lián)免疫儀器

    分離式酶聯(lián)免疫儀器主要有酶標(biāo)儀,、洗板機。在血清離心之后,，經(jīng)過加樣,、洗板、孵育等過程,，zui后通過吸光度判定結(jié)果,。ELISA實驗在國內(nèi)主要用于定性檢驗,，故目前的分離式儀器基本上可以滿足。

    酶標(biāo)儀本質(zhì)上是一臺于微孔板的,、可見光范圍的光電比色計,。在ELISA實驗中，酶標(biāo)儀是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guān)鍵儀器,，對試驗結(jié)果的判定有直接影響,，是實驗室*的重要儀器之一。隨著ELISA技術(shù)的普及,，酶標(biāo)儀得到了很大發(fā)展,，產(chǎn)品種類齊全，型號多樣,，各有特色,。目前國內(nèi)市場上銷售的酶標(biāo)儀已*擺脫原來的單孔測量方式，整板測量,、定性定量計算,、存儲、多種報告格式,、濾光片自動轉(zhuǎn)換等已成為基本的,、*的功能，各種新推出的酶標(biāo)儀性能日益完善,，功能不斷擴充,。具體有：

（1）   測量高速化 從目前不斷推出的酶標(biāo)儀趨勢來看，整板測量速度均在10s以內(nèi),，這有利于防止測量過程中各微孔吸光度的微小變化,，盡可能克服環(huán)境對結(jié)果的影響,，同時可以滿足動力測量的要求,，測量速度在20s以上的儀器將處于不利于地位。我國現(xiàn)生產(chǎn)的酶標(biāo)儀,，測量整板速度一般為25s,產(chǎn)品更新周期較長,。

（2）   寬吸光度范圍  盡管酶標(biāo)儀A=0-2.5的吸光度范圍*可以滿足實驗的要求，但國外新推出的儀器都擴寬了早期型號的吸光度范圍,，較的酶標(biāo)儀其線性范圍可以達(dá)到A=4.0,，并且保持很好的精密度，如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm,、A=0-4.0時其重復(fù)性與線性均不大于3.5%,。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數(shù)范圍達(dá)A=0-4.0，在A=3.0-4.0范圍,，其線性不超過2%, RSD小于1.0%,。

（3）   擴展到紫外 增加紫外濾光片幾乎是廠商的共同選擇,。由于各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的機構(gòu)，可以同時安裝6-8片濾光片,，擴展紫外功能相對容易,，一般都增加340nm濾光片。

（4）   具有孵育功能 可以自動,、控制反應(yīng)溫度,，使微孔板的孵育過程在儀器內(nèi)部完成，降低外界干擾,，簡化操作步驟,。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。

（5）   具有動力學(xué)檢測功能   常規(guī)ELISA是一種終點法測量實驗,，測量前需要加入終止液來抑制酶免反應(yīng)的進(jìn)行,，通過吸光度的大小來計算待測物質(zhì)的濃度，動力學(xué)方法是通過測定反應(yīng)過程中吸光度的變化速率來計算相應(yīng)的待測物質(zhì)的含量的,，酶標(biāo)儀的測量速度加快后,，只要增加相應(yīng)的軟件，就可以使用酶標(biāo)儀完成某些生化指標(biāo)的動力學(xué)測量,。

洗板機是ELISA試驗保證洗滌效果,、進(jìn)而保證實驗質(zhì)量的重要儀器，洗板機的作用已不再是簡單的代替人的手工勞動的自動化裝置,。目前國內(nèi)的洗板機除提供常規(guī)的設(shè)備清洗次數(shù),、清洗條數(shù)、浸泡時間等基本功能之外,，還根據(jù)用戶的需要分別增加了底部沖洗,、兩點吸液、板式/條式洗板,、震蕩,、位置調(diào)節(jié)及自動清洗管路、自動換液存儲多種洗板程序等功能,，清洗殘留量由原來的5-6UL/孔減小到2UL/孔,，有的洗板機允許用戶對洗板過程的每一步的流量、時間,、位置等進(jìn)行詳盡的設(shè)定,。生產(chǎn)廠商根據(jù)各自對洗板技術(shù)的研究，努力提高儀器可靠性與自動化程度,，同時為用戶提供一個*的,、完善的洗滌環(huán)境。國內(nèi)洗板機就洗板效果、產(chǎn)品可靠性等主要指標(biāo)已達(dá)到進(jìn)口以前的水平,，與進(jìn)口儀器相比,，其價格、售后服務(wù)占一定優(yōu)勢,，主要差距是無定量加液,。

組合式的酶聯(lián)免疫儀器

 組合式的酶聯(lián)免疫儀器分三類：全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)、自動樣品處理系統(tǒng),、流水線作業(yè)式組合系統(tǒng),。前兩者主要用于各大血站、醫(yī)院,，后者主要用于試劑生產(chǎn)廠商,。

全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)是將ELISA試驗中的各個步驟，從加樣,、孵育,、洗滌、震蕩,、閉塞到定性或定量分析,、報告存儲與打印功能全部集成在一臺儀器中，由儀器按用戶事先設(shè)計的程序自動進(jìn)行,。HAMILTON公司的FAME(世界上*臺自動板式ELISA系統(tǒng)),、BIORAD公司的CAA、奧斯邦公司的AMP,、TECAN公司的Minilyser,、ORGANO公司的TEKTIME、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)已先后進(jìn)入國內(nèi)市場,。近兩年新進(jìn)入中國市場還有DYNDRX,、公司的DSX、 阿克蘇公司的Flextk2,、BIOASIA代理的TRITURUS等,。全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)的出現(xiàn)滿足了各大醫(yī)院、血站大批量重復(fù)檢驗的要求,，提高了這些單位的檢查檢驗效率與實驗水平,，有效控制了大批量檢驗中極有可能出現(xiàn)的人工操作失誤,，有利于ELISA實驗的質(zhì)量保證與提高,，其國內(nèi)市場穩(wěn)步增長。

自動樣品處理系統(tǒng)主要用于完成ELISA實驗中的繁瑣無味,、人工容易出錯的加樣,、稀釋滴定、孵育、洗滌等步驟,，完成之后再由酶標(biāo)儀判定結(jié)果,。使用自動樣品處理系統(tǒng)利用原有的酶標(biāo)儀，既節(jié)約資金,，又實現(xiàn)了實驗過程的自動化,，是一種很經(jīng)濟(jì)的方案。