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ELISA結(jié)果的鑒定
一,準(zhǔn)確性:免疫學(xué)專一性的測定,。用免疫擴(kuò)散,、交叉電泳和免疫電泳測定抗原和抗體的純度。如果是測定抗原(或半抗原),,一般將放射免疫測定法(RIA)的結(jié)果作比較,;如果是測定抗體,一般將免疫熒光法(IFA)的結(jié)果比較,。用其他實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)來核證,。例如病毒侵染動(dòng)、植物機(jī)體后,,會(huì)出現(xiàn)一系列病理變化,,這些病理數(shù)據(jù)與病毒侵染量如存在線性關(guān)系,那么用ELISA測定病毒的量應(yīng)與病理數(shù)據(jù)的變化相一致,。多次實(shí)驗(yàn),,將每次ELISA結(jié)果進(jìn)行比較。
二,,度:將同一樣品進(jìn)行一系列不同濃度的測定,,得到濃度范圍廣泛的一條曲線,,選擇該曲線坡度陡、重復(fù)性好的區(qū)域作為測定范圍,。對ELISA測定范圍的確定,,有益于選擇實(shí)際使用的合適濃度。
三,,靈性性:ELISA的靈敏性高,,它對許多抗原的測定,靈敏度可達(dá)1-10ng/ml,。作出ELISA某種方法靈敏度高低的結(jié)論要慎重,,因?yàn)樵S多因素會(huì)影響ELISA的靈敏度,例如抗體的效價(jià),、酶的活性,、酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量、反應(yīng)的時(shí)間與溫度,、載體的吸附力,、底物的濃度與pH等。只有在條件嚴(yán)格一致的情況下才能作出比較,。
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