胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)

產(chǎn)品簡介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內(nèi)的腸肽 酶會(huì)活化該酶原，形成胰蛋白酶,。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,，這種過程即自動(dòng)催化,。胰蛋白酶在小腸工作，它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽，進(jìn) 而分解為氨基酸,，其適溫度約為37℃,。Ø Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA,、少量酚紅等組成,，經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,，或者一些組織的消化，通常室溫下 1～2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞,。

產(chǎn)品組成：

Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃

自備材料：

1,、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液

2,、 顯微鏡

3,、 離心機(jī)

操作步驟(僅供參考)：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,，用無菌 PBS,、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清,。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min,， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮,，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化,；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液,。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,，未及吹打細(xì)胞,，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來,。1000～2000g 離心 1min,，沉淀細(xì)胞，盡量

去除胰酶細(xì)胞消化液后,，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

2、組織的消化

不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,，通常以消化后可以充分打散組織為宜,。

注意事項(xiàng)：

1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),，以免失效,。

2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,，要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染,。

3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差,。

4、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

有效期： 12 個(gè)月有效。

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