細胞破碎的方式

細胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁的樣品處理方式,，使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),，是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)（產(chǎn)品）的基礎(chǔ),。 結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,，以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn),。
細胞破碎阻力
細菌
幾乎所有細菌的細胞壁都是由肽聚糖（peptidoglycan）組成,，它是難溶性的聚糖鏈（glycan chain）,，藉助短肽交聯(lián)而成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，包圍在細胞周圍,，使細胞具有一定的形狀和強度,。短肽一般由四或五個胺基酸組成,，如L-丙氨酰-D-谷氨酰-L-賴氨酰-D-丙氨酸。而且短肽中常有D-胺基酸與二氨基庚二酸存在,。破碎細菌的主要阻力是來自于肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),，其網(wǎng)結(jié)構(gòu)的致密程度和強度取決于聚糖鏈上所存在的肽鍵的數(shù)量和其交聯(lián)的程度，如果交聯(lián)程度大,，則網(wǎng)結(jié)構(gòu)就致密,。
酵母菌
酵母細胞壁的里層是由葡聚糖的細纖維組成，它構(gòu)成了細胞壁的剛性骨架,，使細胞具有一定的形狀,，覆蓋在細纖維上面的是一層糖蛋白，外層是甘露聚糖,，由1,6一磷酸二酯鍵共價連接,，形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。在該層的內(nèi)部,，有甘露聚糖-酶的復(fù)合物,，它可以共價連接到網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的方式，也可以不連接,。同細菌細胞壁一樣,，破碎酵母細胞壁的阻力主要決定于壁結(jié)構(gòu)交聯(lián)的緊密程度和它的厚度。酵母種類繁多,，有部分很難破碎,，對于超聲波破碎儀有更高的要求?；旧贤扑]Branson超聲波破碎儀中的大功率型號,，或者引入Branson大功率發(fā)生器，根據(jù)要求專門設(shè)計使用方案,。這樣可以保證理想的使用效果,。
真菌
霉菌的細胞壁主要存在三種聚合物，葡聚糖（主要以β-1,3糖苷鍵連接,，某些以β-1,6糖苷鍵連接）,，幾丁質(zhì)（以微纖維狀態(tài)存在）以及糖蛋白。外層是α-和β-葡聚糖的混合物,，第2層是糖蛋白的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),，葡聚糖與糖蛋白結(jié)合起來，第3層主要是蛋白質(zhì),，內(nèi)層主要是幾丁質(zhì)，幾丁質(zhì)的微纖維嵌入蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中,。與酵母和細菌的細胞壁一樣,，真菌細胞壁的強度和聚合物的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)有關(guān),，不僅如此，它還含有幾丁質(zhì)或纖維素的纖維狀結(jié)構(gòu),，所以強度有所提高,。
植物細胞
對于已生長結(jié)束的植物細胞壁可分為初生壁和次生壁兩部分。 初生壁是細胞生長期形成的,。 次生壁是細胞停止生長后,，在初生壁內(nèi)部形成的結(jié)構(gòu)。 目前,，較流行的初生細胞壁結(jié)構(gòu)是由Lampert等人提出的「經(jīng)緯」模型,，依據(jù)這一模型，纖維素的微纖絲以平行于細胞壁平面的方向一層一層敷著在上面,，同一層次上的微纖絲平行排列,，而不同層次上則排列方向不同，互成一定角度,，形成獨立的網(wǎng)絡(luò),，構(gòu)成了細胞壁的「經(jīng)」，模型中的「緯」是結(jié)構(gòu)蛋白（富含羥脯氨酸的蛋白）,，它由細胞質(zhì)分泌,，垂直于細胞壁平面排列，并由異二酪氨酸交聯(lián)成結(jié)構(gòu)蛋白網(wǎng),，徑向的微纖絲網(wǎng)和緯向的結(jié)構(gòu)蛋白網(wǎng)之間又相互交聯(lián),，構(gòu)成更復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)。半纖維素和果膠等膠體則填充在網(wǎng)絡(luò)之中,，從而使整個細胞壁既具有剛性又具有彈性,。在次生壁中，纖維素和半纖維素含量比初生壁增加很多,，纖維素的微纖絲排列得更緊密和有規(guī)則,，而且存在木質(zhì)素（酚類組分的聚合物）的沉積。因此次生壁的形成提高了細胞壁的堅硬性,，使植物細胞具有很高的機械強度,。由于植物細胞的相對壁厚，超聲波破碎產(chǎn)品的能量集中度會對處理結(jié)果有很大的影響,。超聲波破碎儀一般來說會取得更好的表現(xiàn),。

 人微血管內(nèi)皮細胞株(HMEC-1)

人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞（HK-2）