紫外可見分光光度計的應(yīng)用

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紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用很廣的分析儀器。當(dāng)前已成為*使用zui多、覆蓋應(yīng)用面zui廣的分析儀器,。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生,、化學(xué)化工,、環(huán)保、地質(zhì),、機械,、冶金,、石油、食品,、生物,、材料、計量科學(xué),、農(nóng)業(yè),、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研,、教學(xué)等各個方面,，用來進行定性分析、純度檢查,、結(jié)構(gòu)分析,、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等,。因為儀器涉及到光學(xué),、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等，所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用

（1）定量分析

根據(jù)瑯伯-比爾定律,，樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,，濃度越大，吸收值越高,，所以分光光度計用的zui多的還是定量分析,，定量分析的種類有很多，這里介紹常用的幾種定量分析方法：

A,、法：法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用zui多的一種方法,。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法，某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù),，石英比色皿的光程是已知的,，也是一個常數(shù)。因此,，可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,，測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,，根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,，則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

B,、標(biāo)準(zhǔn)法：在選定的波長處,，在相同的測試條件下，分別測試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后,，按下式求得樣品溶液的濃度或含量,。

C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)

C、標(biāo)準(zhǔn)曲線法

紫外可見分光光度計zui常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法,。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,，再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長下,，測試每個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,，以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。zui后，將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測得吸光度值,，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量,。

A、其它分析方法

除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,，還有比吸收系數(shù)法,、zui小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法,。

（2） 定性分析

如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長λmax,、zui小吸收峰波長λmin、zui大摩爾吸光系數(shù)εmax,，以及吸收峰的數(shù)目,、位置、拐點與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)*一致,，就可以認(rèn)為是同一種化合物,。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。

定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,，特別是定量分析,。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的。