紫外可見分光光度計的應(yīng)用
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紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用很廣的分析儀器。當(dāng)前已成為*使用zui多、覆蓋應(yīng)用面zui廣的分析儀器,。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生,、化學(xué)化工,、環(huán)保、地質(zhì),、機械,、冶金、石油,、食品,、生物、材料,、計量科學(xué),、農(nóng)業(yè)、林業(yè),、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研,、教學(xué)等各個方面,用來進行定性分析,、純度檢查,、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定,、反應(yīng)動力學(xué)研究等,。因為儀器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用
(1)定量分析
根據(jù)瑯伯-比爾定律,,樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,濃度越大,,吸收值越高,,所以分光光度計用的zui多的還是定量分析,,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
A,、法:法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用zui多的一種方法,。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個常數(shù),,石英比色皿的光程是已知的,,也是一個常數(shù)。因此,,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,,測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
B,、標準法:在選定的波長處,,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣,。然后,,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標×C標
C,、標準曲線法
紫外可見分光光度計zui常用的定量分析方法是標準曲線法,。即先用標準物質(zhì)配制一定濃度的溶液,,再將該溶液配制成一系列的標準溶液,。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,,以吸光度值為縱坐標,,標準溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標,繪制標準曲線,。zui后,,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量,。
A,、其它分析方法
除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,還有比吸收系數(shù)法,、zui小二乘法,、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。
(2) 定性分析
如果未知物的紫外吸收光譜的zui大吸收峰波長λmax,、zui小吸收峰波長λmin,、zui大摩爾吸光系數(shù)εmax,,以及吸收峰的數(shù)目、位置,、拐點與標準光譜數(shù)據(jù)*一致,,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì),。
定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,,特別是定量分析。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的,。