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液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟及規(guī)程

時間:2016/1/16閱讀:1928
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液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟及規(guī)程
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液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟及規(guī)程 液相色譜儀操作步驟:

1) 過濾流動相,,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。

2) 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘,。

3) 打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),,連接好流動相管道,,連接檢測系統(tǒng)。 4) 進入HPLC控制界面主菜單,,點擊manual,進入手動菜單,。

5) 有一段時間沒用,,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥,。沖洗泵,,直接在泵的出水口,用針頭抽取,。沖洗進樣閥,,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,,沖洗時速度不要超過10 ml/min,。

6) 調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,,可以先試一下壓力,,流速越大,壓力越大,,一般不要超過2000,。點擊injure,選用合適的流速,,點擊on,,走基線,觀察基線的情況,。

7) 設(shè)計走樣方法,。點擊file,選取se-lect users and methods,,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個新的方法,點擊new method,。選取需要的配件,,包括進樣閥,泵,,檢測器等,,根據(jù)需要而不同。選完后,,點擊protocol,。一個完整的走樣方法需要包括:a.進樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘,;b.基線歸零,;c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;d.走樣時間,,隨不同的樣品而不同,。

8) 進樣和進樣后操作。選定走樣方法,,點擊start,。進樣,所有的樣品均需過濾,。方法走完后,,點擊postrun,,可記錄數(shù)據(jù)和做標記等。全部樣品走完后,,再用上面的方法走一段基線,,洗掉剩余物。

9) 關(guān)機時,,先關(guān)計算機,,再關(guān)液相色譜。

10) 填寫登記本,,由負責人簽字,。

注意事項:

1) 流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水,。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡,。

2) 柱子是非常脆弱的,*次做的方法,,先不要讓液體過柱子,。

3) 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

4) 壓力不能太大,,不要超過2000 psi

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