紫外可見分光光度計(jì)是一種應(yīng)用很廣的分析儀器,。當(dāng)前已成為*使用zui多、覆蓋應(yīng)用面zui廣的分析儀器。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥,、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工,、環(huán)保,、地質(zhì)、機(jī)械,、冶金,、石油、食品,、生物,、材料、計(jì)量科學(xué),、農(nóng)業(yè),、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研,、教學(xué)等各個(gè)方面,,用來進(jìn)行定性分析、純度檢查,、結(jié)構(gòu)分析,、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等,。因?yàn)閮x器涉及到光學(xué),、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用
?。?)定量分析
根據(jù)瑯伯-比爾定律,,樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,濃度越大,,吸收值越高,,所以分光光度計(jì)用的zui多的還是定量分析,,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
A,、法:法是紫外可見分光光度計(jì)諸多分析方法中使用zui多的一種方法,。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長下ε值是一個(gè)常數(shù),,石英比色皿的光程是已知的,,也是一個(gè)常數(shù)。因此,,可用紫外可見分光光度計(jì)在λmax波長處,,測(cè)定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
B,、標(biāo)準(zhǔn)法:在選定的波長處,,在相同的測(cè)試條件下,分別測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測(cè)試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣,。然后,,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)
C,、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
紫外可見分光光度計(jì)zui常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法,。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。在一定波長下,,測(cè)試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo),,標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。zui后,,將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測(cè)得吸光度值,,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對(duì)應(yīng)的濃度或含量。
A,、 其它分析方法
除上述幾個(gè)分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,,還有比吸收系數(shù)法、zui小二乘法,、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法,。