目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC0460-50T/48S土壤中性磷酸酶測試盒 (NP)
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | BC0460 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 | 主要用途 | 測定意義:土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有 |
土壤中性磷酸酶(S-NP)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作,。
貨號:BC0460
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體21 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體11 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2支 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑二:臨用前加入50mL蒸餾水充分溶解,,2-8℃保存8周,;
試劑四:臨用前取1支加入576μL無水乙醇(自備),24μL蒸餾水充分溶解。試劑變褐色后不能再使用,,2-8℃可保存2周,;
標(biāo)準(zhǔn)品:0.5μmol/mL苯*標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說明:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷礦化的酶,,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,,是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳,、氮含量,、有效磷含量和pH顯著影響,根據(jù)最適pH范圍,,通常分為酸性,、中性和堿性三種類型。
中性環(huán)境中,,S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯*和磷酸*鈉,,通過測定酚的生成量即可計算出S-NP活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗,。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測,。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿,、臺式離心機,、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平,、可調(diào)式移液器,、研缽、冰,、蒸餾水,、乙醇、30~50目篩和甲苯(不允許快遞),。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,,具體比可以例參考文獻(xiàn))
1. 新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,,過30~50目篩。
2.稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g,,加入0.05mL甲苯(自備),,輕搖15min;然后再加入0.4mL試劑一并且充分搖勻,,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱,,開始計時,催化反應(yīng)24h;到時后取出并迅速加入1mL試劑二,,充分混勻,,以終止酶催化的反應(yīng)。10000rpm,,25℃離心10min,,取上清液置于冰上待測。
二,、測定步驟
分光光度計預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長到660nm,蒸餾水調(diào)零,。
空白管:取1mL玻璃比色皿,,依次加入50μL試劑一,200μL試劑三,,20μL試劑四,,充分混勻,顯色后再加730μL蒸餾水,,混勻后室溫靜置30min,,于660nm測定吸光度,記為A空白管,。
標(biāo)準(zhǔn)管:取1mL玻璃比色皿,,依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液,200μL試劑三,,20μL試劑四,,充分混勻,顯色后再加730μL蒸餾水,,混勻后室溫靜置30min,,于660nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管,。
注:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定1-2次,。
測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入50μL上清液,,200μL試劑三,,20μL試劑四,充分混勻,,顯色后再加730μL蒸餾水,,混勻后室溫靜置30min,于660nm測定吸光度,,記為A測定管,。
三、S-NP活性計算
活性單位定義:37℃中每克土壤每天釋放1nmol酚為1個酶活單位。
S-NP活性(U/g 土樣)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)] ×1000×V總÷W÷T
=725×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL,;V總:催化體系總體積,,1.45mL;W:土壤樣本質(zhì)量,,g,;T:催化反應(yīng)時間,24h=1d,;1000:單位換算系數(shù),,1μmol=1000nmol。
注意事項:
測定期間請將樣本在冰上放置,,以免酶變性或失活,。
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土壤中性磷酸酶測試盒 (NP) 土壤中性磷酸酶測試盒 (NP)
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