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Feulgen stain 的原理是DNA經(jīng)溫和的弱酸(例如鹽酸)水解后,,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基,。醛基在原位與Schiff reagent結(jié)合,,形成紫紅色化合物,使細胞內(nèi)含有DNA的部位呈紫紅色,。紫紅色的產(chǎn)生是因為反應(yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)有醌基(醌基是一個具有顏色的發(fā)色團),,所以凡含有DNA的部位,,就呈紫紅色。
染色后用SO2水洗片,,目的是洗去多余的非特異性色素及擴散的染料,。亞硫酸可與堿性品紅反應(yīng)生成品紅亞硫酸,,從而可以將用schiff劑染色時所殘留的堿性品紅反應(yīng)掉,。使其更加清晰、潔凈,。