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土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作,。
貨號(hào)：BC2895
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解,，2-8℃可以保存4周,；

2. 試劑四：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解，2-8℃可以保存4周,；

3. 定磷試劑的配制：臨用前按試劑二：試劑三：試劑四=1:1:1的體積比配制。配好的定磷試劑應(yīng)為淺黃色,。若無(wú)色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染,，限當(dāng)天使用,。配制過(guò)程中,，可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體，其不影響結(jié)果,，注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。（注意：配制時(shí)最好使用新的燒杯,、玻璃棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿,，以避免磷污染。）

4. 標(biāo)準(zhǔn)品：10 μmol/mL磷標(biāo)準(zhǔn)液,。

產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤總磷包括有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷，其中無(wú)機(jī)磷能夠直接被植物利用,。土壤有機(jī)磷經(jīng)過(guò)礦化分解而轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷,。同時(shí)測(cè)定土壤總磷,、有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷,，可以全面反映土壤磷營(yíng)養(yǎng)狀況。
利用鉬藍(lán)法定磷,。取一份土樣，通過(guò)浸提法測(cè)定土壤無(wú)機(jī)磷含量,；另外取一份土樣，經(jīng)高溫灼燒后,，土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷,，測(cè)得土壤總磷含量,；總磷含量減去無(wú)機(jī)磷含量，即可計(jì)算出有機(jī)磷含量,。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.015 µmol/mL
線性范圍：0.0323-6.0 µmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋,、分析天平、可調(diào)式移液器,、550℃高溫電爐,、研缽,、蒸餾水、30-50目篩,、100目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

一,、樣本處理：（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1.無(wú)機(jī)磷：稱(chēng)取通過(guò)30-50目篩子的風(fēng)干土樣0.01g,，轉(zhuǎn)移到1mL離心管,，加入1mL試劑一,，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h,，8000rpm，離心10min,，取上清液一,，用于無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定,。
2.總磷提取：取通過(guò)100目篩子的風(fēng)干土樣,，550℃灼燒1h,，冷卻后稱(chēng)取約0.01g，轉(zhuǎn)移到1 mL離心管,，加入1mL試劑一，震蕩混勻,，然后置于45℃水浴1h,，8000rpm,，離心10min，取上清液二,，用于總磷含量測(cè)定。
二,、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2. 1μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取100μL 10 1μmol/mL磷標(biāo)準(zhǔn)液,，加入900μL蒸餾水,，充分混勻,，配制成1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

3. 打開(kāi)水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃,。

4. 空白管：取EP管,，依次加入100μL 蒸餾水,，100μL 定磷試劑,，混勻后置于40℃水浴保溫10min,，室溫冷卻10min后于660nm測(cè)定吸光度,，記為A空白管。空白管只需做1-2次,。

5. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入10μL 標(biāo)準(zhǔn)液,，90μL 蒸餾水，100μL 定磷試劑,，混勻后置于40℃水浴保溫10min,，室溫冷卻10min后于660nm測(cè)定吸光度,，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。標(biāo)準(zhǔn)管只需做1-2次,。

6. 測(cè)定管：取EP管，依次加入10μL 上清液一或者上清液二,，90μL 蒸餾水，100μL 定磷試劑,，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測(cè)定吸光度,，記為A測(cè)定管,。

注意事項(xiàng)：

1. 如果吸光值大于1時(shí),，樣本需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋。

2. 空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定1-2次,。

3. 需在40min內(nèi)完成比色。

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