目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>蛋白酶系列>> 紫外分光光度法胰蛋白酶測(cè)試盒
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更新時(shí)間:2024-07-08 17:58:55瀏覽次數(shù):1398評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號(hào) | BC2310 | 主要用途 | 胰蛋白酶活性測(cè)定 |
胰蛋白酶測(cè)試盒
貨號(hào):BC2310
規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
測(cè)定意義:
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈,是一種重要的消化酶,。此外,,胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸,、外科炎癥,、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫,、血腫及膿腫等的輔助治療,。
測(cè)定原理:
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵,生成BA,,BA在253nm處有吸收峰,,通過(guò)測(cè)定253nm 吸光度增加速率,即可計(jì)算出胰蛋白酶的活性,。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、研缽,、冰和蒸餾水,。
一、 粗酶液提?。?/strong>
稱取約 0.1g 樣品,,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000 rpm 4℃離心 10min,,取上清液,,即粗酶液,置冰上待測(cè),?;蛘咧苯臃Q取 1mg 酶粉,加 1mL 提取液,,充分混勻后置冰上待測(cè)(為保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性建議梯度稀釋),。
二、 測(cè)定:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 253 nm,,蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液的配制:將試劑一與試劑二按 2:97 配置工作液,,按需配制,,并置于 37℃水浴預(yù)熱 30min以上,。
3. 空白管:取 1mL 石英比色皿,加入 990µL 工作液,,再加入 10μL 蒸餾水,,混勻,迅速于 253nm測(cè)定 0s 和 60s 的吸光度,,記為△A 空白,。
4. 測(cè)定管:取 1mL 石英比色皿,加入 990µL 工作液,,再加入 10μL 粗酶液,,混勻,迅速于 253nm測(cè)定 0s 和 60s 的吸光度,,記為△A 測(cè)定,。
三、 胰蛋白酶活性計(jì)算:
1.按蛋白濃度計(jì)算:
活性單位(U)定義:在 1mL 體系下,,37℃每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個(gè)單位,。
胰蛋白酶(U/mg prot)= (△A 測(cè)定-△A 空白) ÷0.001÷(Cpr×V1)÷T
=100000×(△A 測(cè)定-△A 空白) ÷Cpr2.按樣本鮮重計(jì)算:
活性單位(U)定義:在 1mL 體系下,37℃每克組織每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個(gè)單位,。
胰蛋白酶(U/mg prot)= (△A 測(cè)定-△A 空白) ÷0.001÷(W×V1÷V2)÷T
=100000×(△A 測(cè)定-△A 空白) ÷W
Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),,需要另外測(cè)定;W:組織質(zhì)量(g),;V1:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(mL),,10μL=0.01 mL;V2:粗酶液總體積(mL),,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間(min),1min,。
實(shí)驗(yàn)前用 1~2 個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),,保證吸光值變化在 0.01~0. 15 之間。
胰蛋白酶測(cè)試盒訂購(gòu)說(shuō)明:
1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2,、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn),。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,,部分城市可到17點(diǎn)整,,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5,、請(qǐng)辦理完貨款后,,將底單等連同收貨人的地址、姓名,、等以傳真,、、短信,、等形式通知我們,。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,。
3,、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中,。
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