目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC5090-50T/48S土壤游離氨基酸含量檢測(cè)試劑盒 土壤
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更新時(shí)間:2024-07-08 14:36:39瀏覽次數(shù):473評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢(xún) | 純度 | 詳詢(xún) |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢(xún) | 分子式 | 詳詢(xún) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號(hào) | BC5090 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 土壤游離氨基酸(S-FAA)含量檢測(cè) |
土壤游離氨基酸(S-FAA)含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):BC5090
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。
試劑名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體30mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1,、 試劑四:臨用前取1瓶加2 mL蒸餾水,充分溶解,,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,;
2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg半胱*酸,。臨用前加入4.13 mL蒸餾水,,得到20 μmol/mL的半胱*酸標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,用不完的試劑可以2-8℃保存4周,。
產(chǎn)品說(shuō)明:
作為土壤中一類(lèi)重要的化合物,,氨基酸占土壤中全氮的15%-60%,是土壤氮素循環(huán)和植物養(yǎng)分供給過(guò)程中重要的“庫(kù)"和“源",,可通過(guò)礦化作用滿足作物氮素營(yíng)養(yǎng)的需求,,也可以被植物直接吸收利用。另外,,氨基酸也是土壤微生物重要的氮源,,對(duì)于土壤微生物群落結(jié)構(gòu)、數(shù)量和活性均有直接影響,。因此,,研究土壤中氨基酸含量變化規(guī)律,對(duì)研究土壤氮素循環(huán),,及其對(duì)植物生理生態(tài)變化的影響均有重要意義,。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng)在570nm有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定570nm吸光度,,來(lái)計(jì)算氨基酸含量,。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品:
臺(tái)式離心機(jī),、可見(jiàn)分光光度計(jì),、水浴鍋/金屬浴、1mL玻璃比色皿,、可調(diào)式移液槍,、研缽、30-50目篩,、冰和蒸餾水,。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,,具體比例可以參考文獻(xiàn))
土樣37℃/自然風(fēng)干后過(guò)30-50目篩,,稱(chēng)取約0.15g土樣,,加試劑一1mL,,振蕩2h,10000rpm離心10min,,取上清液,,待測(cè)。
二,、測(cè)定步驟
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至570nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)喝?/span>40μL 20μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液加入160μL蒸餾水得4μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。
3. 操作表:(在EP管中進(jìn)行)
試劑名稱(chēng)(μL) | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本 | 200 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)品 | - | 200 | - |
蒸餾水 | - | - | 200 |
試劑二 | 500 | 500 | 500 |
試劑三 | 500 | 500 | 500 |
試劑四 | 50 | 50 | 50 |
混勻后蓋緊(纏封口膜防止水分散失),100℃反應(yīng)15min,,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,,將測(cè)定管8000rpm離心5min后取上清,于570nm測(cè)定吸光值,,分別記為A測(cè)定管,、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,,并計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定管-A空白管,,ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完,。
標(biāo)準(zhǔn)管,、空白管只需做1-2次。
三,、S-FAA含量計(jì)算
S-FAA含量(μmol/g 土樣)=(C標(biāo)準(zhǔn)品×V標(biāo)準(zhǔn)品×ΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管)÷(V樣÷V樣總×W)
=4×ΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,,4μmol/mL;V標(biāo)準(zhǔn)品:反應(yīng)體系中加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,,0.2mL,;W:土樣質(zhì)量,,g;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,,0.2mL,;V樣總:樣本總體積,1mL,。
注意事項(xiàng):
1,、 試劑四需臨用前配制,且避光保存,。
2,、 脯*酸和羥脯*酸與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量,。
3、 如果ΔA測(cè)定管大于1,,建議將樣本用試劑一稀釋后進(jìn)行測(cè)定,。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1、 取0.15g土樣加入1mL試劑一進(jìn)行樣本處理,,取上清后按照測(cè)定步驟操作,,使用1mL玻璃比色皿測(cè)得A測(cè)定管=0.645、A標(biāo)準(zhǔn)管=0.745,、A空白管=0.052,,計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定管-A空白管=0.645-0.052=0.593,ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.745-0.052=0.693,,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:
S-FAA(μmol/g土樣)=4×ΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管÷W=4×0.593÷0.693 ÷0.15=22.819 μmol/g 土樣,。
參考文獻(xiàn):
[1] Wang X, Cui X Y, Guo Y F A study on free amino acid in different forest types soil of cold-temperate forest region[J]. Journal of Nanjing Forestry University (Natural Science Edition), 2016, 59(04): 42-48.
[2] Wang B, Jiang Y Y, Jiao J G, et al. Effects of earthworm on constituent and amount of amino acid in soil[J]. Acta Ecologica Sinica, 2015,35(14):4816-4823.
[3] Zhang X J, Wang W Y, Li W Q, et al. Dynamics of soil dissolved organic nitrogen in alpine meadow[J]. Journal of Lanzhou University: Natural Sciences, 2016, 52(5):623-627.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0040/BC0045 土壤硝態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒
BC1510/BC1515 土壤銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒
土壤游離氨基酸含量檢測(cè)試劑盒 土壤 土壤游離氨基酸含量檢測(cè)試劑盒 土壤
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