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HEPES. 氨基酸與蛋白質

HEPES緩沖液是細胞培養(yǎng)實驗中經常用到的緩沖液,。在開放式的培養(yǎng)條件中,，加入HEPES緩沖液，可防止培養(yǎng)基內pH氧化升高,，從而將PH維持在7.0左右,。那么，HEPES緩沖液的配制步驟和方法是怎樣的,，下面就給大家詳細介紹,。

HEPES分子量為238.31，,，分子式: C8H18N2O4S。

HEPES常用于生物緩沖劑,，pH值緩沖范圍：6.8-8.2,，用在生化診斷試劑盒、DNA/rna提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里,。對細胞無毒性作用,。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍,。使用終濃度為10-50mmol/L,。

關于HEPES 緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法,。根據用途,，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽,。各種配制方法總結如下：

一,、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液調節(jié)少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2),，然后用蒸餾水定容500ml,，于4攝氏度保存。

二,、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g,、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g,、用0.5M NaOH 水溶液調節(jié)pH值,，后定容。

三,、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制

將1.6g NaCl,、0.074g KCl,、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水,，用0.5M NaOH調節(jié)所需pH值,，再用蒸餾水定容100ml即可。

生物緩沖試劑,，可用于配制蛋白提取緩沖液,、細胞培養(yǎng)用緩沖液等。有效緩沖范圍為pH6.8-8.2,。

HEPES. 氨基酸與蛋白質

參考文獻：

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