日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

植物根系活力檢測試劑盒（TTC法）說明書

微量法

貨號：BC5275

規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1,、 試劑一：臨用前取一支試劑一B加入一瓶試劑一A中，加入30mL試劑二溶解?，F(xiàn)用現(xiàn)配,。配制好后置于2-8℃，一周內(nèi)使用,，若出現(xiàn)紅色,，則不能使用。

2,、 試劑二：若試劑有結(jié)晶析出，可40℃加熱或者超聲溶解,。

3,、 試劑四：乙酸乙酯，自備,。提供一125mL 空瓶,。

4、 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1mL試劑二,，充分震蕩混勻, 即10mg/mL TTC標(biāo)準(zhǔn)液,。2-8℃可以保存1周，若出現(xiàn)紅色,，則不能使用,。

產(chǎn)品說明：

根系是植物吸收水分和礦質(zhì)營養(yǎng)的主要器官，同時(shí)又是植物體中重要物質(zhì)如氨基酸,、激素等物質(zhì)合成,、同化、轉(zhuǎn)化的器官,，因此根的生長情況和活動(dòng)能力直接影響植物個(gè)體的生長情況,、營養(yǎng)水平和產(chǎn)量水平等，根系活力具有重要的實(shí)際意義,。

TTC可被氫還原成不溶性的紅色三苯基甲臜（TTF）,，TTF在485nm處有吸收峰。當(dāng)TTC溶液滲入到植物根部組織時(shí),，呼吸過程產(chǎn)生的還原物質(zhì)可將其還原成TTF(紅色),，植物根部組織被染成紅色。根系活力強(qiáng)弱可用TTC的還原量來表示,。此方法檢測的根系活力即植物根系的脫氫酶活性,。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、微量玻璃比色皿/96孔板(非聚苯乙烯材質(zhì)),、研缽/勻漿器、乙酸乙酯,，冰和蒸餾水,。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

樣本的制備：將根部組織洗凈,，去除根上的泥土，輕輕擦干,，不要過分?jǐn)D壓破壞根系細(xì)胞,。

二、測定步驟

1,、 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至485nm，可見分光光度計(jì)用乙酸乙酯調(diào)零,。

2,、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：

（1） 臨用前取10μL 10mg/mL TTC標(biāo)準(zhǔn)液，加入1990μL試劑二,，充分混勻,，配制成50μg/mL TTC標(biāo)準(zhǔn)溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配,。（后續(xù)實(shí)驗(yàn)需要1000μL,，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積,。）

（2） 取1mL 50 μg/mL TTC標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到一支試劑三內(nèi),，充分震蕩混勻2min?；靹蚝蠹尤?/span>1mL乙酸乙酯,，再次充分震蕩混勻2min，室溫靜置分層5min,，取上層溶液,。

（3） 將上層溶液用乙酸乙酯進(jìn)行稀釋，得到20μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液備用（吸取200μL 50 μg/mL TTC加入300μL乙酸乙酯混勻即可）,。

3,、標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定

取200μL 20μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液和200μL乙酸乙酯（即0μg/mL）于微量玻璃比色皿或96孔板(非聚苯乙烯材質(zhì))中,，分別測定其在485nm處的吸光度。計(jì)算ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A_{（20μg/mL）}-A_{（0μg/mL）},。ΔA標(biāo)準(zhǔn)只需做1-2次,。

4、在2mL EP管按下表步驟加樣：

充分研磨（建議在通風(fēng)櫥操作）后全部移至于離心管中,，12000 rpm,，4℃，離心 10min,，取 200μL 上清至微量玻璃比色皿或96孔板(非聚苯乙烯材質(zhì))中,，測定 485nm下的吸光值。計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照（標(biāo)準(zhǔn)曲線只需做1-2次,，每一個(gè)測定管對應(yīng)一個(gè)對照管）,。ΔA測定的測定范圍在0.005-1.5之間,。

三,、根系活力計(jì)算

按照樣本質(zhì)量計(jì)算根系活力：以TTC的還原量來表示根系活力

TTC還原強(qiáng)度 [ μg TTC/(g·h) ] =ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V÷ (W×T)=5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

W：根重，g,；C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,，20μg/mL；T：反應(yīng)時(shí)間,，4h,；V：試劑四的體積即勻漿體積，1mL,。

注意事項(xiàng)：

1,、 試劑四容易揮發(fā)，有毒,，為了您的健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服，戴口罩,，戴乳膠手套操作,。

2、 若樣品37℃暗反應(yīng)未到4h但根系已出現(xiàn)深粉色,，此時(shí)可以直接進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)操作,；若ΔA測定大于1.5,，可以減少樣本質(zhì)量或者縮短反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，計(jì)算公式注意修改,。

3,、 若4h暗反應(yīng)結(jié)束后，根系沒有出現(xiàn)粉色或者ΔA測定小于0.005,，可以延長暗反應(yīng)時(shí)間（8h,，16h甚至24h）或者加大樣品量，計(jì)算公式注意修改,。

4,、 如果離心后待測的上清依然渾濁，可嘗試加大離心轉(zhuǎn)速或者延長時(shí)間,，例如15000rpm 4℃離心20min,。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 稱取0.131g蔥的根部,，洗凈,，擦干，按照測定步驟操作,，用96孔板（非聚苯乙烯材質(zhì)）測得計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.714-0.082=0.632,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A_{（20μg/mL）}-A_{（0μg/mL）}=0.660-0.042=0.618，帶入公式計(jì)算：

TTC還原強(qiáng)度=5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =39.033 μg TTC/(g·h)

2,、 稱取0.126g景天的根部,，洗凈，擦干,，按照測定步驟操作,，用96孔板（非聚苯乙烯材質(zhì)）測得計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.422-0.139=0.283，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A_{（20μg/mL）}-A_{（0μg/mL）}=0.660-0.042=0.618,，帶入公式計(jì)算：

TTC還原強(qiáng)度=5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =18.172 μg TTC/(g·h)

3,、 稱取0.118g蒜的根部，洗凈,，擦干,，按照測定步驟操作，用96孔板（非聚苯乙烯材質(zhì)）測得計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.191-0.055=0.136,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A_{（20μg/mL）}-A_{（0μg/mL）}=0.660-0.042=0.618,，帶入公式計(jì)算：

TTC還原強(qiáng)度=5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W =9.325 μg TTC/(g·h)

參考文獻(xiàn)：

[1] Xiuyun Zhu, Meng Liang,Yu Ma. A Review Report on the Experiments for the Determination of Root Activity by TTC Method[J]. Guangdong Chemical Industry, 2020

[1] Sangen Wang. Plant Physiology Experiment Course[M]. Science Press, 2005.

相關(guān)系列產(chǎn)品：

    BC3120/BC3125 植物脫氫酶（PDHA）活性檢測試劑盒

植物根系活力（TTC法）檢測試劑盒 微量法 植物根系活力（TTC法）檢測試劑盒 微量法