目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC1955-100T/48S土壤錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間:2024-04-19 13:53:50瀏覽次數(shù):676評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢(xún) | 純度 | 詳詢(xún) |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢(xún) | 分子式 | 詳詢(xún) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
貨號(hào) | BC1955 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 土壤錳過(guò)氧化物酶(S-Mnp)檢測(cè) |
土壤錳過(guò)氧化物酶(S-Mnp)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),,請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作,。
貨號(hào):BC1955
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。
試劑名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1. 試劑一:甲苯,需自備,。
2. 試劑三:臨用前加入3.5mL蒸餾水,,用不完的試劑可在2-8℃保存3個(gè)月,禁止放置于-20℃,。
產(chǎn)品說(shuō)明:
錳過(guò)氧化物酶 (EC1.11.1.13) 是一種含鐵血紅素的過(guò)氧化物酶,,其廣泛存在于白腐擔(dān)子真菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,,是木質(zhì)素起始降解的關(guān)鍵酶,,能有效地降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物、疊氮化合物,、DTT,、多環(huán)方烴等,在農(nóng)業(yè)廢棄物處理、生物降解,、生物漂白,、染料脫色等領(lǐng)域有較多的研究和應(yīng)用。
錳過(guò)氧化物酶在Mn2+存在的條件下,,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,,在465nm有特征吸收峰。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板,、震蕩儀,、甲苯、30-50目篩和蒸餾水,。
操作步驟:
一,、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃風(fēng)干,,過(guò)30-50目篩,。
二、測(cè)定步驟
1,、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至465nm,分光光度計(jì)需用蒸餾水調(diào)零,。
2,、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(chēng)(μL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
土樣(g) | 0.08 | 0.08 |
試劑一(μL) | 40 | 40 |
充分震蕩混勻,25℃準(zhǔn)確水浴15min | ||
試劑二(μL) | 240 | 280 |
試劑三(μL) | 40 | - |
試劑四(μL) | 80 | 80 |
試劑五(μL) | 40 | 40 |
充分混勻,,于30℃振蕩反應(yīng)3h,,于11000g,4℃離心10min (如果尚未澄清,,可取出上清后再次離心),,取200μL于微量比色皿/96孔板,測(cè)定465nm處吸光值,,記為A測(cè)定管和A對(duì)照管,,ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。注意:每個(gè)測(cè)定管均需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,。 |
三、S-Mnp活力的計(jì)算
a.用微量玻璃比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下:
酶活性定義:每克土壤每小時(shí)氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個(gè)酶活力單位,。
S-Mnp活性(U/g 土樣)=ΔA÷(ε×d)×V反總×109÷W÷T=12.121×ΔA÷W
ε:愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù):12100L/mol/cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,,0.44×10-3L,;W:樣本質(zhì)量,g,;T:反應(yīng)時(shí)間,,3h;109:換算系數(shù),,1mol=109 nmol,。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下:
酶活性定義:每克土壤每小時(shí)氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
S-Mnp活性(U/g)=ΔA÷(ε×d)×V反總×109÷W÷T=20.202×ΔA÷W
ε:愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù):12100L/mol/cm,;d:96孔板光徑,,0.6cm;V反總:反應(yīng)總體積,,0.44×10-3L,;W:樣本質(zhì)量,g,;T:反應(yīng)時(shí)間,,3h。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測(cè)試劑盒
BC0890/BC0895 土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)活性檢測(cè)試劑盒
BC1960/BC1965 土壤漆酶活性檢測(cè)試劑盒
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土壤錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒 微量法 土壤錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒 微量法
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