目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC5730-50T/24S土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間：2024-04-23 10:54:51瀏覽次數(shù)：819評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳詢(xún) | 純度 | 詳詢(xún) |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢(xún) | 分子式 | 詳詢(xún) |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
| 貨號(hào) | BC5730 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 土壤酸性木聚糖酶活性檢測(cè) |
土壤中性木聚糖酶（S-NEX）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC5730
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 |
緩沖液 | 液體25mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體12mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體16mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1,、 標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖,。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標(biāo)準(zhǔn)液，2-8℃保存8周,。
產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤中性木聚糖酶（Soil neutral xylanase, S-NEX）,，又稱(chēng)為土壤中性半纖維素酶，主要分離自最適生長(zhǎng)pH為6-8的微生物,。
在中性環(huán)境中,，S-NEX催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,，在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,，可計(jì)算S-NEX活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、天平,、低溫離心機(jī),、水浴鍋、研缽,、30~50目篩,、蒸餾水。
操作步驟：具體的操作步驟請(qǐng)見(jiàn)“產(chǎn)品資料"文件
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩,。
二,、測(cè)定步驟
1、 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,，蒸餾水調(diào)零。
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)号R用前將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋為1.5,、1.2、1,、0.8,、0.6、0.4μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè),。
3,、 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表：
稀釋前濃度（μmol/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)品體積（μL） | 蒸餾水體積（μL） | 稀釋后濃度（μmol/mL） | |
1 | 100 | 100 | 900 | 10 |
2 | 10 | 150 | 850 | 1.5 |
3 | 10 | 120 | 880 | 1.2 |
4 | 10 | 150 | 1350 | 1 |
5 | 1 | 400 | 100 | 0.8 |
6 | 1 | 300 | 200 | 0.6 |
7 | 1 | 200 | 300 | 0.4 |
備注：實(shí)驗(yàn)中每管需要300μL。
4,、 樣本測(cè)定（在EP管中加入下列試劑）
試劑名稱(chēng)（μL） | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
樣本 | 0.1g | 0.1g | - | - |
緩沖液 | 400 | 400 | - | - |
試劑一 | - | 200 | - | - |
渦旋混勻,，置于50℃水浴鍋中反應(yīng)2h，立即沸水浴中10min滅活,。（注意不要讓蓋子爆開(kāi),，以免進(jìn)水，改變了反應(yīng)體系）,，冷卻至室溫,。 | - | - | ||
試劑一 | 200 | - | - | - |
常溫，12000g離心10min,，取上清 | - | - | ||
上清液 | 300 | 300 | - | - |
蒸餾水 | - | - | 300 | - |
標(biāo)準(zhǔn)品 | - | - | - | 300 |
試劑二 | 200 | 200 | 200 | 200 |
渦旋混勻,，沸水浴中準(zhǔn)確顯色5min（注意不要讓蓋子爆開(kāi),，以免進(jìn)水改變了反應(yīng)體系）,，冷卻至室溫。 | ||||
蒸餾水 | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混勻，于1mL玻璃比色皿中測(cè)定540nm下的吸光度,，分別記為A對(duì)照,、A測(cè)定、A空白,、A標(biāo)準(zhǔn),。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白,?？瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)曲線只需測(cè)1-2次。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,。 | ||||
注意事項(xiàng)：
1. 若樣本ΔA<0.01,，可適當(dāng)增大樣本量或者延長(zhǎng)50℃反應(yīng)時(shí)間后測(cè)定；若樣本ΔA>1.5或者A測(cè)定＞1.5時(shí),，可用蒸餾水稀釋上清液后測(cè)定,，注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。
2. 建議使用螺旋管,，防止沸水浴過(guò)程中蓋子爆開(kāi),，改變反應(yīng)體系。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1,、 取0.1g野蘑菇土,，按操作表進(jìn)行第一步反應(yīng)2h后，取上清液用蒸餾水稀釋2倍后按照測(cè)定步驟操作,，用1mL玻璃比色皿測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=0.498-0.108=0.390,，帶入標(biāo)曲y=0.5887x-0.1537（R2=0.9982），計(jì)算x=0.924,，按樣本質(zhì)量計(jì)算S-NEX活性得：
S-NEX活性（U/g 土樣）=0.3× x÷W×F =5.544 U/g 土樣,。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC5720/BC5725 土壤酸性木聚糖酶（S-ACX）活性檢測(cè)試劑盒
BC5740/BC5745 土壤堿性木聚糖酶（S-BAX）活性檢測(cè)試劑盒
土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 土壤中性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒
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