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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>抗逆系列>> BC0090-50管/48樣過氧化物酶（POD）生化檢測試劑盒 抗逆系列

過氧化物酶（POD）生化檢測試劑盒 抗逆系列
  • 過氧化物酶（POD）生化檢測試劑盒 抗逆系列
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC0090-50管/48樣
  • 廠商性質 生產商
  • 產品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間：2024-04-03 14:07:52瀏覽次數(shù)：2320評價

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號 BC0090 應用領域 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè),綜合
主要用途 檢測樣本中的過氧化物酶含量
過氧化物酶（POD）生化檢測試劑盒 抗逆系列
檢測方法可見分光光度法
POD廣泛存在于動物,、植物,、微生物和培養(yǎng)細胞中,，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,，具有消除過氧化氫和酚類,、胺類毒性的雙重作用,。
試驗中所需的儀器和試劑：可見分光光度計,、臺式離心機、可調式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水


過氧化物酶（POD）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動,，請注意并嚴格按照該說明書操作,。
貨號：BC0090
規(guī)格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員,。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體0.04 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體10 mL×1瓶2-8℃保存
溶液的配制：

  1. 試劑二：液體置于試劑瓶內EP管中,，使用前需先離心。取0.01 mL試劑二加入3.2mL試劑一混合備用（約24T）,，現(xiàn)配現(xiàn)用,，也可根據(jù)樣本量按比例配制,。

產品說明：
POD（EC 1.11.1.7）廣泛存在于動物、植物,、微生物和培養(yǎng)細胞中,，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過氧化氫和酚類,、胺類毒性的雙重作用,。POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收,。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗,。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計,、臺式離心機,、可調式移液器、1mL玻璃比色皿,、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀,、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一,、樣本處理（可適當調整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻）

  1. 細菌,、細胞或組織樣本的制備：

細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內,，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液）,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴,，功率200W，超聲3s,，間隔10s,，重復30次）；8000g 4℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL提取液）,，進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。

  1. 血清（漿）樣本：直接檢測,。

二,、測定步驟
1,、分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長至470nm,，蒸餾水調零,。
2、測定前將試劑一,、二和三37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）放置10min,。
3、樣本測定表：
 
試劑名稱（µL）測定管
樣本15
蒸餾水270
試劑一520
試劑二130
試劑三135
在1mL玻璃比色皿中按順序加入上述試劑,，立即混勻并計時,，記錄470nm下30s時的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。計算ΔA=A2-A1,。
三,、POD活性計算

  1. 血清（漿）POD活性

單位定義：每mL血清（漿）在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
POD（U/mL）=ΔA×V反總÷V樣÷0.01÷T =7133×ΔA

  1. 組織,、細菌或細胞POD活性

  1. 按樣本蛋白濃度計算

單位定義：每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位,。
POD（U/mg prot）=ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.01÷T =7133×ΔA÷Cpr

  1. 按樣本質量計算

單位定義：每g組織在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位。
POD（U/g 質量）=ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.01÷T =7133×ΔA÷W

  1. 按細菌或細胞數(shù)量計算

單位定義：每1萬個細菌或細胞在每mL反應體系中每分鐘A470變化0.01為一個酶活力單位,。
POD（U/104 cell）=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.01÷T =14.27×ΔA
V反總：反應體系總體積,，1.07mL；V樣：加入樣本體積,，0.015mL,；V樣總：加入提取液體積，1 mL,；T：反應時間,，1min；Cpr：樣本蛋白質濃度,，mg/mL,；W：樣本質量，g,；500：細菌或細胞總數(shù),，500萬。
注意事項：

  1. 若一次性測定樣本較多,，可將試劑一,、二、三和蒸餾水按比例配成混合液,，在37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）放置10min以上,，測定時加入15µL樣本和1055µL混合液測定。

  2. 如果ΔA小于0.005,，可將反應時間延長到5min,。如果ΔA大于0.5或者反應液中有較多氣泡產生,，可將樣本用提取液稀釋后測定，計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù),。

實驗實例：
取0.1043g大鼠心臟加入1mL提取液進行冰浴勻漿,。8000g，4℃離心 10min,，取上清置冰上,，用提取液稀釋2倍后按照測定步驟操作，用玻璃比色皿測定并計算ΔA=A2-A1=0.363-0.134=0.229,。按樣本質量計算含量得：
POD（U/g 質量）=7133×ΔA÷W×2（稀釋倍數(shù)）=3.132×104 U/g 質量,。
取0.1049g黃楊葉片，加入1mL提取液進行冰浴勻漿,。8000g,，4℃離心 10min，取上清置冰上,，按照測定步驟操作,，用玻璃比色皿測定并計算ΔA=A2-A1=0.549-0.11=0.439。按樣本質量計算含量得：
POD（U/g 質量）=7133×ΔA÷W=2.985×104 U/g 質量


相關發(fā)表文獻：

  1. Yin Y J, Chen C J, Guo S W, et al. The fight against Panax notoginseng root-rot disease using zingiberaceae essential oils as potential weapons[J]. Frontiers in plant science, 2018, 9: 1346.

  2. Dou S, Liu S, Xu X, et al. Octanal inhibits spore germination of Penicillium digitatum involving membrane peroxidation[J]. Protoplasma, 2017, 254(4): 1539-1545.

  3. Li B, Ding Y, Tang X, et al. Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)[J]. Food and Bioprocess Technology, 2019, 12(4): 563-574.

  4. Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,et al. Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton. Environmental and Experimental Botany. June 2019;162:364-373.(IF3.712)

  5. Yanjiao Yin,Chuanjiao Chen,Shiwei Guo,et al. The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons. Frontier in Immunology. October 2018;(IF4.716)

參考文獻：
[1] Reuveni R. Peroxidase Activity as a Biochemical Marker for Resistance of Muskmelon (Cucumis melo) to Pseudoperonospora cubensis[J]. Phytopathology, 1992, 82(7).
[2] Doerge D R, Divi R L, Churchwell M I. Identification of the Colored Guaiacol Oxidation Product Produced by Peroxidases[J]. Analytical Biochemistry, 1997, 250(1):10-17.
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BC0190/BC0195  多酚氧化酶（PPO）活性檢測試劑盒
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