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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>谷胱甘肽系列>> BC1210-50T/24Sγ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽

γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
  • γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
  • γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
  • γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
  • γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC1210-50T/24S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-04-08 11:46:37瀏覽次數(shù):1059評(píng)價(jià)

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同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品

更多產(chǎn)品
CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/24S
貨號(hào) BC1210 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 γ-谷氨酰半*氨酸連接酶(GCL)活性檢測(cè)
儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
γ-glutamylcysteine Ligase(GCL) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S


γ-谷氨酰半*氨酸連接酶(GCL)活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作,。
貨號(hào)BC1210
規(guī)格50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體45 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二A液體15mL×1瓶2-8℃保存
試劑二B粉劑×1-20℃保存
試劑三粉劑×12-8℃保存
試劑四液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑五粉劑×12-8℃保存
試劑粉劑×12-8℃保存
試劑液體10 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二B:臨用前加6 mL蒸餾水充分震蕩溶解,,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,,禁止反復(fù)凍融;

  2. 試劑二的配制:臨用前根據(jù)樣本量按試劑二A:試劑二B=1.3mL0.52mL(共1.82mL,,7T)的比例配制,,現(xiàn)用現(xiàn)配,當(dāng)天用完,。

  3. 試劑三:臨用前加5 mL蒸餾水充分震蕩溶解,,2-8℃可以保存4周;

  4. 試劑五:臨用前加入10 mL蒸餾水溶解,,用不完的試劑2-8℃保存2,;

  5. 試劑六:臨用前加入10 mL蒸餾水溶解,用不完的試劑2-8℃保存2,;

  6. 工作液:臨用前根據(jù)樣本量試劑五:試劑六:試劑=0.5mL0.5mL0.5mL(共1.5mL,,3T的比例配制,配好的工作液應(yīng)為淺黃色,。若無色則試劑失效,,若是藍(lán)色則為磷污染,,限當(dāng)天使用。(注意:配制工作液最好使用新的燒杯,、玻璃棒玻璃移液器,,或者一次性塑料器皿,以避免磷污染,。

  7. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 μmol/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

  8. 0.1μmol/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:臨用前0.1mL 10 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液0.9mL蒸餾水混合,配制濃度為1 μmol/mL,;再取0.1mL 1 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液0.9mL蒸餾水混合配制成0.1μmol/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液使用,。

產(chǎn)品說明:
GCL(glutamate cysteine ligase)是GSH合成的限速酶,GSH對(duì)GCL有反饋抑制作用,。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),,如氧化劑、抗氧化劑,、生長因子和炎癥因子等,。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/*比值有重要影響。

在ATP和Mg2+存在下,,GCL催化*氨酸和半*氨酸合成γ-谷氨酰半*氨酸,;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子,通過測(cè)定無機(jī)磷增加速率,,即可計(jì)算出GCL活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、冷凍離心機(jī),、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、移液器、1mL玻璃比色皿,、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀和蒸餾水,。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):

  1. 樣本處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測(cè)定酶活力,,以免影響其活力,。如果是勻漿液,避免反復(fù)凍融,。

  2. 樣本測(cè)定前先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),,如吸光值大于1,應(yīng)先用試劑一(或者生理鹽水)稀釋到適當(dāng)倍數(shù),,哺乳動(dòng)物組織和血液一般稀釋3-5倍,。

  3. 細(xì)胞中GCL活性測(cè)定時(shí),,細(xì)胞數(shù)目須在300-500萬之間,細(xì)胞中GCL的提取時(shí)可加試劑一(或生理鹽水)后研磨或超聲波處理,,不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞,。

  4. 測(cè)定吸光值時(shí)請(qǐng)于水浴后10-40分鐘內(nèi)測(cè)完。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g柳樹加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,。8000g,,4℃離心10min,取上清,,置冰上按照測(cè)定步驟操作,,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.923-0.635=0.288ΔA標(biāo)= A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.514-0.002=0.512,,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

GCL(U/g 質(zhì)量)=0.0544×ΔA測(cè)÷ΔA標(biāo)÷W=0.306 U/g 質(zhì)量,。

  1. 取0.1g脾臟加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,,4℃離心10min,,取上清稀釋5倍,置冰上按照測(cè)定步驟操作,,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.713-0.285=0.428,,ΔA標(biāo)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.514-0.002=0.512按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

GCL(U/g 質(zhì)量)=0.0544×ΔA測(cè)÷ΔA標(biāo)÷W×5(稀釋倍數(shù))=2.274 U/g 質(zhì)量,。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1170/BC1175 還原型谷胱*肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒
BC1180/BC1185 氧化型谷胱*肽(*)含量檢測(cè)試劑盒

γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽 γ-谷氨酰半*氨酸連接酶試劑盒 谷*甘肽


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