目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-常量法>>輔酶Ⅱ系列>> BC1150-50T/48S硫氧還蛋白還原酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
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更新時(shí)間:2024-04-07 13:59:22瀏覽次數(shù):1519評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢(xún) | 純度 | 詳詢(xún) |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢(xún) | 分子式 | 詳詢(xún) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
貨號(hào) | BC1150 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 硫氧還蛋白還原酶(TrxR)活性檢測(cè) |
硫氧還蛋白還原酶(TrxR)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作,。
貨號(hào):BC1150
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
溶液的配制:
試劑三:試劑放于瓶?jī)?nèi)玻璃瓶中,,臨用前取1瓶加入3.33 mL蒸餾水溶解,,用不完的試劑-20℃保存2周;
試劑四:體積量少,,請(qǐng)離心后再使用,。臨用前根據(jù)樣本數(shù)量將試劑四用無(wú)水乙醇稀釋10倍后使用。
產(chǎn)品說(shuō)明:
TrxR(EC,,EC 1.8.1.9)是一種NADPH依賴(lài)的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng),。TrxR與GR活性類(lèi)似,,催化*G還原生成GSH,是谷胱*肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一,。
TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,,TNB在412nm有特征吸收峰,但還原型谷胱*肽與DTNB同樣能反應(yīng)生成TNB,,因此本試劑盒利用2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型谷胱*肽,,通過(guò)測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率,,即可計(jì)算TrxR活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī),、可調(diào)節(jié)移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀,、蒸餾水,、冰和無(wú)水乙醇。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):
哺乳動(dòng)物組織及血液制品TrxR活力測(cè)定時(shí),,一般須用蒸餾水稀釋5倍左右,;測(cè)定過(guò)程操作須迅速。
由于試劑一中含有一定濃度的蛋白(約0.1mg/mL),,所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量,。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
取0.1g月季花朵加入1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,10000rpm,,4℃離心10min,,取上清置冰上,按照測(cè)定步驟操作,,測(cè)得計(jì)算ΔA =(A2測(cè)定-A1測(cè)定)-(A2空白-A1空白)=(0.763-0.716)-(0.082-0.064)=0.029,,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:TrxR(U/g 質(zhì)量)=147×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管)÷W=42.63 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠肝臟組織加入1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,,10000rpm,,4℃離心10min,取上清稀釋2倍置冰上,,按照測(cè)定步驟操作,,測(cè)得計(jì)算ΔA =(A2測(cè)定-A1測(cè)定)-(A2空白-A1空白)=(1.508-0.4)-(0.082-0.064)=1.09,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:TrxR(U/g 質(zhì)量)=147×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管)÷W×2(稀釋倍數(shù))=3204.6 U/g 質(zhì)量,。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):
Li B, Li D, Jing W, et al. Biogenic selenium and its hepatoprotective activity[J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 1-11.
Zhang L, Fan J, He J, et al. Regulation of ROS–NF‐κB axis by tuna backbone derived peptide ameliorates inflammation in necrotizing enterocolitis[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 14330-14338.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1170/ BC1175 還原型谷*甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒
BC1180/ BC1185 氧化型谷*甘肽(*G)含量檢測(cè)試劑盒
BC1190/ BC1195 谷*甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)活性檢測(cè)試劑盒
BC0350/ BC0355 谷*甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性檢測(cè)試劑盒
硫氧還蛋白還原酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶 硫氧還蛋白還原酶活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
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