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更新時(shí)間：2022-08-07 16:31:18瀏覽次數(shù)：1097評(píng)價(jià)
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細(xì)胞凋亡檢測(cè)Hoechst 33342染色液（1mg/ml）DNA核酸染色
貨號(hào)：C0031
規(guī)格：1mL/1mL×10
別名 : bisBenzimide H 33342;HOE 33342
儲(chǔ)存條件 : -20℃避光保存,，一年有效,。
單位 : 盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Hoechst 33342，也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342,，是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè),。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33342的大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,，大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm,；Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,，大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm,。本Hoechst 33342染色液為即用型，可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,。
使用說明：
使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33342染色液稀釋100倍，即為工作液,。
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織： a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品,，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑,。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,，則行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色,。如果不需要進(jìn)行其它染色,，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。 b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,，加入少量Hoechst 33342工作液,，覆蓋住樣品即可；對(duì)于懸浮細(xì)胞,，少加入待染色樣品3倍體積的工作液,，混勻。室溫放置3-5分鐘,。 c. 吸除Hoechst 33342染色液,，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,，每次3-5分鐘,。 d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織： a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33342工作液,，必須充分覆蓋住待染色的樣品,，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1mL工作液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100μL工作液,。 b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè),。
注意事項(xiàng)：
Ø 熒光染料都存在淬滅的問題,，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè),，活細(xì)胞或組織染色后應(yīng)立即觀察,。
Ø 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
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