日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

1-吡咯啉-５-羧酸合成酶（P5CS）活性檢測試劑盒說明書

微量法

貨號：BC4425

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1、試劑三：臨用前取1支加入0.833 mL蒸餾水溶解,，現(xiàn)配現(xiàn)用,。-20℃分裝保存；-20℃保存一周,；

2,、試劑四：臨用前加入3 mL蒸餾水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用,。-20℃分裝保存,；-20℃保存一周。

產(chǎn)品說明：

在干旱,、鹽漬化,、重金屬、紫外線等不同的脅迫條件下,，均會誘導(dǎo)植物體內(nèi)脯*酸的積累,，對植物起到保護(hù)作用。高等植物中,，脯*的合成有兩條途徑,，分別以谷/酸和鳥*酸為前體。谷/酸途徑主要負(fù)責(zé)脅迫條件下脯*酸的積累,，而鳥*酸途徑主要在氮充足條件下起作用,，與脅迫情況下脯*酸的積累沒有關(guān)系,。

1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）是脯*酸的谷/酸合成途徑中的關(guān)鍵酶，P5CS是一個雙功能酶,，在NADPH和ATP作用下,，可催化谷/酸磷酸化及/氨酸 γ-半醛還原，通過測定NADPH在340 nm處吸光度的變化,，可計算出P5CS的活性高低。

Glutamate+Glutamate Gamma-Semialdehyde+NADPH(340nm)+ ATP             Compound

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測,。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī),、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍,、研缽/勻漿器,、冰和蒸餾水、EP管,。

操作步驟：

一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

組織樣本：按質(zhì)量（g）︰提取液體積（mL）1︰5~10比例（建議稱取0.1 g樣本,，加入1.0 mL提取液一）加入提取液一,，冰浴勻漿后加入10 μL提取液二，于4℃,，8000 rpm,，離心15 min，棄沉淀,，取上清液置于冰上待測,。

二、測定步驟

1,、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,，調(diào)節(jié)波長至340 nm，蒸餾水調(diào)零,。  

2,、 將試劑三、試劑四置于冰上待測,。

3,、 操作表：（在微量石英比色皿/96孔UV板中操作）

注意：空白管只需測定1-2次。

三,、P5CS酶活計算

1,、按樣本蛋白濃度計算

酶活單位定義：每毫克組織蛋白每分鐘消耗1 nmol NADPH為一個酶活單位。

P5CS酶活（U/mg prot）=ΔA÷ε÷d×V反總×10⁹÷(V樣×Cpr)÷T =321.54×ΔA÷Cpr÷d

2,、按樣本質(zhì)量計算

酶活單位定義：每克組織每分鐘消耗1 nmol NADPH為一個酶活單位,。

P5CS酶活（U/g 質(zhì)量）= ΔA÷ε÷d×V反總×10⁹÷(W×V樣÷V樣總)÷T =324.76×ΔA÷W÷d

ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×10³ L/mol/cm,；d：微量比色皿光徑,，1 cm/96孔UV板光徑，0.6 cm,；V反總：反應(yīng)體系總體積,，2×10^-4L；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL,；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.02 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1.01 mL；W：樣本質(zhì)量,，g,；T：反應(yīng)時間，5 min,；10⁹：單位換算系數(shù),，1mol=10⁹nmol。

注意事項(xiàng)：

1,、當(dāng)A1測定高于1.5或者ΔA大于0.5時,，建議將樣本稀釋后檢測，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù),。

2,、盡量使用新鮮樣本進(jìn)行檢測，操作時請置于冰上操作,。

3,、ΔA空白管的數(shù)值一般不超過0.05。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1,、取0.1g三葉草進(jìn)行樣本處理,，樣本稀釋2倍,，按照測定步驟操作（微量石英比色皿檢測），計算得ΔA測定管= A1測定-A2測定=1.0302-0.9842=0.046,，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.7431-0.7248=0.0183,，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0277，按照樣本質(zhì)量計算酶活得：

P5CS酶活（U/g 質(zhì)量）=324.76×ΔA÷W=179.9U/g 質(zhì)量,。

相關(guān)系列產(chǎn)品：

BC0290/BC0295 脯*（PRO）含量檢測試劑盒

BC1580/BC1585 谷*酸（Glu）含量檢測試劑盒

BC4400/BC4405 鳥*酸轉(zhuǎn)氨酶（δ-OAT）活性檢測試劑盒

BC0070/BC0075 谷*酸合成酶（GOGAT）活性檢測試劑盒

BC1550/BC1555 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性檢測試劑盒

吡咯啉-５-羧酸合成酶活性檢測試劑盒 微量  吡咯啉-５-羧酸合成酶活性檢測試劑盒 微量