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果膠酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動,，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2635
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：
試劑一：將試劑一A倒入試劑一B于50℃水浴中溶解（期間可拿出振蕩數(shù)次）,。該試劑易長菌，配制完成后可-20℃分裝保存,，可保存12周,。
標(biāo)準(zhǔn)品：10mg半乳糖醛酸。臨用前加入0.943mL蒸餾水,，配成50μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液,。
產(chǎn)品說明：
果膠酶（pectinase）是分解果膠的酶類，包括原果膠酶,，果膠酯酶,，多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類，廣泛存在于高等植物果實和微生物中,，是水果加工中最重要的酶,。
果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸與DNS試劑反應(yīng)生成在540nm有特征吸收峰的棕紅色物質(zhì),，測定540nm處吸光值變化可計算得果膠酶活性,。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測,。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī)、水浴鍋,、微量玻璃比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器,、冰和蒸餾水,。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. A大于1.5時，建議將樣本用提取液稀釋后再進(jìn)行測定,。

2. 植物果實組織建議將樣本用提取液稀釋10倍或20倍后再測定,。

實驗實例：

1. 取0.1g蘋果加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g,，4℃,，離心10min，取上清稀釋10倍之后按照測定步驟操作,，用96孔板測得計算ΔA= A測定管-A對照管=1.466-1.357=0.109,，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.1428x-0.1022，計算X=1.479μmol/mL,，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

果膠酶活性（U/g質(zhì)量）=2x÷W×10（稀釋倍數(shù)）=295.8 U/g質(zhì)量,。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali. Microbial Pathogenesis. October 2018;132-138.(IF2.581)

2. Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Two members of the velvet family,VmVeA and VmVelB,affect conidiation,virulence and pectinase expression in Valsa mali. Molecular Plant Pathology. November 2017;(IF4.379)

相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC3680 /BC3685 原果膠含量檢測試劑盒
BC4120/BC4125 可溶性果膠含量檢測試劑盒
BC4150/BC4155 離子結(jié)合型果膠（ISP）含量檢測試劑盒 
BC2640/BC2645 果膠裂解酶（PL）活性檢測試劑盒

酸性木聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法 酸性木聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法