AO染色液(1mg/ml)

AO染色液(1mg/ml)

產(chǎn)品簡介

      流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化,。

      吖啶橙(Acridine Orange, AO)屬于三環(huán)雜芳香燃料,，可以標(biāo)記 DNA,、RNA，屬于異染性熒光染 料,。該染料具有膜通透性,，能透過細(xì)胞膜，使核 DNA 和 RNA 染色,。因此 AO 常用于細(xì)胞內(nèi) DNA 和 RNA 進(jìn)行檢測,。AO 與核酸結(jié)合方式主要有：1、插入性結(jié)合,，AO 嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,， 這種結(jié)合方式主要為 AO 與 DNA 的結(jié)合,，其熒光發(fā)射峰為 530nm，激發(fā)后呈綠色熒光,；2,、靜電吸 引，帶正電荷的 AO 與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合,，這種結(jié)合方式主要為 AO 與 RNA 的結(jié)合,，其熒光發(fā)射峰為 640nm，激發(fā)后呈紅色熒光,，少量結(jié)合會(huì)呈桔黃色或桔紅色熒 光,。因此，吖啶橙嵌合到雙鏈 DNA 分子中顯綠色,，與 DNA 單鏈或 RNA 結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色 熒光,。
吖啶橙染色液(1mg/ml)為儲(chǔ)存液，使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用,。染色后在熒光顯微鏡下觀 察,，吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,；而在凋亡細(xì)胞中,，因染色質(zhì)固 縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體,。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片 顆粒,；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙染色常與 EB 染色合用雙染,，因 EB 只染死細(xì)胞使 之產(chǎn)生桔黃色熒光,，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。
 

自備材料：  

熒光顯微鏡,，低速離心機(jī) ，PBS,，細(xì)胞計(jì)數(shù)板 ,，載玻片、蓋玻片 

操作步驟(僅供參考)：

      1,、 收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測時(shí),，應(yīng)先固定細(xì)胞)，用 PBS 清洗細(xì)胞 1 次,，計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃 度至 106/ml,。
      2、 取適量的細(xì)胞懸液,，加入 Acridine Orange Stain(1mg/ml),，使 AO 終濃度為 8.5～17µg/ml,，輕輕混 勻。
      3,、 室溫避光染色 15～20min,，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析。
      4,、 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長 488nm,，阻斷濾光片波長 515nm)，計(jì)數(shù)并拍照,。

注意事項(xiàng)：

      1,、 Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜劑，較少單獨(dú)使用,。
      2,、 吖啶橙染色常與 EB 染色合用，可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。
      3、 如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳,。
      4,、 操作過程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。
      5,、 試劑有一定毒性,，請小心操作。
      6,、 為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

索萊寶介紹

北京索萊寶科技有限公司（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. <span font-weight:500;font-size:24px;background-color:#ffffff;"="" style=";padding: 0px;box-sizing: border-box;-webkit-tap-highlight-color: transparent">）是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。

總部位于北京,，并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu),。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“Solarbio"良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心,、以產(chǎn)品為保障,、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團(tuán)隊(duì)以及*的倉儲(chǔ)和物流系統(tǒng),。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員，我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新,。產(chǎn)品覆蓋面廣,，品質(zhì)可靠,。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、免疫學(xué),、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),，索萊寶公司提供各種常規(guī)生化試劑,，庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種，可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑,。在質(zhì)量方面,，索萊寶謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,，科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,，我們恪守對每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時(shí),，公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍,，能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁I(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買索萊寶產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務(wù),。

公司理念：“為科研服務(wù),，為生命盡責(zé)"。一個(gè)人能夠走多遠(yuǎn),，取決于與誰同行,。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。

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