AO染色液(1mg/ml)

AO染色液(1mg/ml)

產(chǎn)品簡介

      流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。

      吖啶橙(Acridine Orange, AO)屬于三環(huán)雜芳香燃料,，可以標(biāo)記 DNA、RNA,，屬于異染性熒光染 料,。該染料具有膜通透性，能透過細(xì)胞膜,，使核 DNA 和 RNA 染色,。因此 AO 常用于細(xì)胞內(nèi) DNA 和 RNA 進行檢測。AO 與核酸結(jié)合方式主要有：1,、插入性結(jié)合,，AO 嵌入核酸雙鏈的堿基對之間， 這種結(jié)合方式主要為 AO 與 DNA 的結(jié)合,，其熒光發(fā)射峰為 530nm,，激發(fā)后呈綠色熒光；2,、靜電吸 引,，帶正電荷的 AO 與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合，這種結(jié)合方式主要為 AO 與 RNA 的結(jié)合,，其熒光發(fā)射峰為 640nm,，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結(jié)合會呈桔黃色或桔紅色熒 光,。因此,，吖啶橙嵌合到雙鏈 DNA 分子中顯綠色，與 DNA 單鏈或 RNA 結(jié)合時發(fā)桔黃色或橙紅色 熒光,。
吖啶橙染色液(1mg/ml)為儲存液，使用時應(yīng)稀釋到合適濃度后使用,。染色后在熒光顯微鏡下觀 察,，吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,；而在凋亡細(xì)胞中,，因染色質(zhì)固 縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體,。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片 顆粒,；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙染色常與 EB 染色合用雙染，因 EB 只染死細(xì)胞使 之產(chǎn)生桔黃色熒光,，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
 

自備材料：  

熒光顯微鏡,，低速離心機 ,，PBS，細(xì)胞計數(shù)板 ,，載玻片,、蓋玻片 

操作步驟(僅供參考)：

      1、 收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測時,，應(yīng)先固定細(xì)胞),，用 PBS 清洗細(xì)胞 1 次，計數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃 度至 106/ml,。
      2,、 取適量的細(xì)胞懸液，加入 Acridine Orange Stain(1mg/ml),，使 AO 終濃度為 8.5～17µg/ml,，輕輕混 勻。
      3,、 室溫避光染色 15～20min,，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析。
      4,、 熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長 488nm,，阻斷濾光片波長 515nm)，計數(shù)并拍照,。

注意事項：

      1,、 Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜劑，較少單獨使用,。
      2,、 吖啶橙染色常與 EB 染色合用，可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。
      3、 如有低溫離心機進行離心效果更佳,。
      4,、 操作過程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強光下的時間。
      5,、 試劑有一定毒性,，請小心操作,。
      6、 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

索萊寶介紹

北京索萊寶科技有限公司（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. <span font-weight:500;font-size:24px;background-color:#ffffff;"="" style=";padding: 0px;box-sizing: border-box;-webkit-tap-highlight-color: transparent">）是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè),。

總部位于北京,，并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“Solarbio"良好的品牌形象,。公司秉承“以客戶為中心,、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ),、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統(tǒng)。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員,，我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新,。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠,。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué),、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒,。同時，索萊寶公司提供各種常規(guī)生化試劑,，庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,，可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面,，索萊寶謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量高于一切,。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程，科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,，我們恪守對每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌,。同時，公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊伍,，能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù),。每一位購買索萊寶產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務(wù)。

公司理念：“為科研服務(wù),，為生命盡責(zé)"。一個人能夠走多遠(yuǎn),，取決于與誰同行,。索萊寶公司期待與各同行精誠合作,。

索萊寶誠招生物試劑研發(fā)人員，期待與廣大同行精誠合作,，為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,，高效的物流以及專業(yè)的售后服務(wù)。索萊寶感謝所有朋友的支持與幫助,，您的支持是我們前進的動力和保障,。讓我們攜手同行，共同創(chuàng)造美好的明天,。