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更新時(shí)間:2024-04-16 14:47:49瀏覽次數(shù):787評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號(hào) | BC4365 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 草酸含量檢測(cè) |
草酸含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
貨號(hào): BC4365
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體1.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
2、 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前加入792µL蒸餾水配制成100 µmol/mL草酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,;
產(chǎn)品說(shuō)明:
草酸是一種二元羧酸,,廣泛存在于植物界中,且在不同領(lǐng)域有著不同的作用:在醫(yī)藥,、印染,、塑料等工業(yè)生產(chǎn)中,草酸可用作制藥原料,、絡(luò)合劑,、漂白劑、沉淀劑以及還原劑等;從食品角度看,,長(zhǎng)期食用草酸含量高的蔬菜,,容易引發(fā)關(guān)節(jié)炎、低血鈣,、膀胱結(jié)石和腎結(jié)石等疾病,,而被認(rèn)為是礦物元素的拮抗物。
Fe3+在pH為2的條件下可以與磺基水楊酸生成紫色絡(luò)合物,,在510 nm處有特征吸收峰,。草酸及草酸根可以使Fe3+與磺基水楊酸的紫色絡(luò)合物顏色變淺,且Fe3+與磺基水楊酸絡(luò)合物的吸光度隨著草酸量的增加而降低,,據(jù)此可由降低的吸光值計(jì)算出樣本中草酸的含量,。
低檢出限:0.1601 μmol/mL
線性范圍:0.1875-18 μmol/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、微量玻璃比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器,、冰和蒸餾水、EP管,。
一,、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
組織:按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1 g,,加入1 mL蒸餾水)充分勻漿,,然后加入少許試劑四(約3-5mg),震蕩混勻后置于75℃水浴鍋脫色30 min,,期間搖晃2-3次,,脫色后常溫3000r/min離心15 min,取上清置于冰上待測(cè)(若組織沉淀與試劑四不能一次性離心去除時(shí),,建議將上清多離心幾次,;若一
次脫色不全時(shí),建議重復(fù)脫色至溶液呈無(wú)色或略呈乳白色),。
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至510 nm,,蒸餾水調(diào)零。
2、 將100 µmol/mL的草酸標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋為18,、15,、12、6,、3,、1.5、0.75,、0.375 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用,。
試劑名稱(µL) | 空白管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
試劑一 | 20 | 20 | 20 |
試劑二 | 150 | 150 | 150 |
試劑三 | 10 | 10 | 10 |
蒸餾水 | 20 | - | - |
樣本 | - | 20 | - |
標(biāo)準(zhǔn)溶液 | - | - | 20 |
混勻,,室溫靜置20 min | |||
于微量玻璃比色皿/96孔板測(cè)定510 nm處吸光值A,,分別記為A空白管、A測(cè)定管,、A標(biāo)準(zhǔn)管,。計(jì)算ΔA=A空白管-A測(cè)定管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A空白管-A標(biāo)準(zhǔn)管,。同一批檢測(cè)樣本需測(cè)1-2個(gè)空白管(標(biāo)準(zhǔn)管只需檢測(cè)1-2次),。 |
注意:如果檢測(cè)樣本量大,可以根據(jù)樣本所需按照試劑一:試劑二:試劑三=2:15:1(v:v:v)的比例配制成工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,,加樣體系為180 µL工作液,,20 µL樣本(蒸餾水或標(biāo)準(zhǔn)溶液)。
1,、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y= kx+b,將ΔA帶入方程得到x(µmol/mL),。
2,、 草酸含量的計(jì)算:
草酸含量(mg/g質(zhì)量)= x×V提取×M×10-3÷W=0.09x÷W
V提取:加入的蒸餾水體積,,1mL,;W:樣本質(zhì)量,g,;M:草酸分子質(zhì)量90.04,;10-3:?jiǎn)挝粨Q算系數(shù),1 µg=10-3 mg,。
注意事項(xiàng):
1. 如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值,,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
2. 如將試劑一、試劑二與試劑三配成工作液使用時(shí),,按照配制比例根據(jù)樣本量所需現(xiàn)配現(xiàn)用,,不得一次性配完待用。
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草酸含量檢測(cè)試劑盒 微量法 草酸含量檢測(cè)試劑盒 微量法
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