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血氨含量檢測(cè)試劑盒說明書

微量法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作,。

貨號(hào)：BC4385

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1,、 試劑一：臨用前根據(jù)樣本量按照試劑一A液：試劑一B液=100μL：400μL（共0.5mL，約5T）的比例進(jìn)行配制,，現(xiàn)配現(xiàn)用,；

2、 標(biāo)準(zhǔn)品：100μmol/mL 氨標(biāo)準(zhǔn)液,；

3,、 2μmol/mL 氨標(biāo)準(zhǔn)液：臨用前吸取20μL 100μmol/mL 氨標(biāo)準(zhǔn)液和980μL蒸餾水混合均勻配制成2μmol/mL 氨標(biāo)準(zhǔn)液備用，作為標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)溶液使用,。

產(chǎn)品說明：

血氨主要來源是內(nèi)源性氨和外源性氨,。氨在血中保持恒定狀態(tài),，即血氨的來源和去路保持動(dòng)態(tài)平衡。氨是有毒物質(zhì),，主要在肝臟進(jìn)行代謝解毒,。當(dāng)肝功能嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，氨不能被解毒,。氨在中樞神經(jīng)系統(tǒng)聚集,，從而導(dǎo)致肝性腦病。

本法根據(jù)氨的靛酚藍(lán)反應(yīng)原理,，通過蛋白沉淀劑將血清（漿）中蛋白沉淀后,，利用酚-次氯酸鹽直接顯色法測(cè)定血氨，生成的藍(lán)色靛酚和氨的濃度成正比,，在630 nm處有特殊吸收峰,，據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中血氨的含量。本試劑盒可測(cè)各種動(dòng)物血清（漿）等樣本中血氨的含量,，樣本禁止溶血,。檸檬酸鈉、肝*鈉,、EDTA等抗凝劑對(duì)實(shí)驗(yàn)均無影響,。

技術(shù)指標(biāo)：

低檢出限：0.0251 μmol/mL

線性范圍：0.0625-6 μmol/mL

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè),。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、微量玻璃比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍、蒸餾水,、EP管,。

操作步驟：

一、測(cè)定步驟

1,、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至630 nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零,。

2,、 操作表：（在1.5 mL EP管中操作）

二,、血氨含量計(jì)算

血氨含量（μmol/mL）= C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V樣÷V樣= 2×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

V樣：加入的樣本體積，0.04mL,；C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，2μmol/mL,。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑一配制后盡快使用,，若發(fā)現(xiàn)變色則不能使用。

2. ΔA若小于0.01,，建議增加量,，同時(shí)減少提取液體積（如80μL血清（漿）+160μL提取液）；若ΔA若大于1.0,，建議減少樣本量,，同時(shí)提高提取液體積或者稀釋上清液進(jìn)行測(cè)定，注意同步修改計(jì)算公式或者乘以稀釋倍數(shù),。

3. 所用器材和取血裝置均應(yīng)無氨,；采血后應(yīng)立即測(cè)定，不能立即測(cè)定2-8℃可保留2h,；樣本禁止溶血,。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例

取馬血清按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA= A測(cè)定管-A空白管=0.256-0.056=0.200,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.386-0.056=0.330,，計(jì)算含量得：

血氨含量（μmol/mL）=2×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=1.212 μmol/mL。

取胎牛血清按照測(cè)定步驟操作,，使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA= A測(cè)定管-A空白管=0.224-0.056=0.168,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.386-0.056=0.330，計(jì)算含量得：

血氨含量（μmol/mL）=2×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=1.018 μmol/mL,。

相關(guān)系列產(chǎn)品：

BC2770/BC2775  血鉀濃度檢測(cè)試劑盒

BC2790/BC2795  血鎂濃度檢測(cè)試劑盒

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