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更新時(shí)間:2025-04-22 14:23:08瀏覽次數(shù):1893評(píng)價(jià)
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Aureobasidin A(AbA)金擔(dān)子素A
貨號(hào):A6870
規(guī)格:1mg
分子式 : C60H92N8O11
分子量 : 1100
儲(chǔ)存條件 : 冰袋運(yùn)輸。4℃保存,。
純度 : ≥95%
外觀(guān)(性狀) : 熔點(diǎn) 155-157℃
單位 : 瓶
商品貨號(hào): | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價(jià): | 選擇規(guī)格 |
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A6870-1mg | Solarbio | 1mg | 1900.00元 |
金擔(dān)子素A(Aureobasidin A,,AbA)是從絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分離出來(lái)的環(huán)酯肽類(lèi)抗生素,具有很強(qiáng)的抗真菌能力,。在較低的濃度下(0.1-0.5 μg/ml)即可對(duì)酵母產(chǎn)生毒性,。對(duì)其敏感的真菌種類(lèi)包括:出牙酵母(Saccharomyces cerevisiae),、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata),、構(gòu)巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger.),。作用機(jī)制在于AbA抑制了真菌生長(zhǎng)所依賴(lài)的肌醇磷酰胺(inositol phosphorylceramide,IPC)合成酶的活性,,干擾鞘脂合成,,從而進(jìn)一步殺死菌株。編碼IPC合成酶的基因研究較多的有來(lái)自釀酒酵母菌的AUR1 基因,,以及構(gòu)巢曲霉的AURA基因,,兩者具有同源性。通過(guò)對(duì)這些編碼基因進(jìn)行突變即可使得菌株對(duì)AbA產(chǎn)生抗性,,如AUR1-C基因,。
AbA非常適合用作陽(yáng)性克隆子篩選用的藥物選擇性標(biāo)記。AbA抗性也是酵母單/雙雜交研究中理想的報(bào)告子,。本品為溶于甲醇的AbA溶液,濃度為1 mg/ml,。具體的工作濃度取決于宿主細(xì)胞的敏感度(見(jiàn)表1. AbA對(duì)各種酵母菌的低抑菌濃度(MIC)),。
操作步驟(抗AbA的酵母轉(zhuǎn)化系統(tǒng))
1)加入0.5 ml培養(yǎng)的酵母到50 ml YPD培養(yǎng)基中(配方:1L液體培養(yǎng)基含有10g yeast extract,20g polypeptone,, 20g D-glucose,;固體培養(yǎng)基另外加入2%瓊脂;),。
2)30℃培養(yǎng)約6小時(shí),,測(cè)定OD660為1~2。使用二倍體時(shí),,測(cè)定OD660為2~4,。
3)1,000×g離心5分鐘。
4)用10 ml Solution A(配方:100 mM Lithium acetate,,10 mM Tris-HCl pH 7.5,,1 mM EDTA)懸浮沉淀,1,000×g離心5分鐘,。
5)用Solution A重懸沉淀,,直到OD660為150。
6)在管內(nèi)分取100 µl細(xì)胞懸浮液,,30℃培養(yǎng)1小時(shí),。
7)加入5 μg載體(環(huán)狀或線(xiàn)性DNA)和150 μg Carrier DNA(已經(jīng)過(guò)100℃加熱10分鐘,并迅速冷卻),。
【注】:pAUR101需使用線(xiàn)性DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化,。使用環(huán)狀DNA會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率甚轉(zhuǎn)化不成功,。pAUR112和pAUR123需使用完整的質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化。
8)加入850 µl Solution B(配方:取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100 ml Solution A充分溶解,,需要現(xiàn)用現(xiàn)配),,輕輕混勻。
9)30℃培養(yǎng)30分鐘后,,42℃培養(yǎng)15分鐘,。
10)室溫放置10分鐘。
11)5,000 rpm離心1分鐘,,用5 ml YPD培養(yǎng)基懸浮沉淀,。
12)30℃培養(yǎng)6小時(shí)~。
13)5,000~10,000 rpm離心,,用1-10 ml 0.9% NaCl懸浮沉淀,。
14)在YPD選擇培養(yǎng)基平板(含有一定濃度的AbA,依菌株類(lèi)型而定)上接種100 µl細(xì)胞懸液,。30℃培養(yǎng)3-4天后轉(zhuǎn)化完成,。
15)挑取陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子,和/或測(cè)定轉(zhuǎn)化效率(以每微克質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化的菌落數(shù)來(lái)表示),。
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Aureobasidin A(AbA)金擔(dān)子素A訂購(gòu)說(shuō)明:
1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。
2,、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4,、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5,、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名、等以傳真,、,、短信,、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1,、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),,再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),,然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3,、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中,。
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