目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4265-100T/96S直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間:2024-04-15 10:34:00瀏覽次數(shù):641評(píng)價(jià)
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CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號(hào) | BC4265 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 直鏈淀粉含量檢測(cè) |
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體100 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | - | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體0.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑六 | 液體10mL×1支 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
試劑二:*100 mL自備;
試劑四:提供125 mL空瓶一個(gè),;將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,,現(xiàn)用現(xiàn)配,2-8℃保存半年,;
標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg直鏈淀粉,。臨用前加入0.1 mL無(wú)水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,,沸水浴至溶解,,即10 mg/mL的直鏈淀粉,2-8℃保存半年,。
樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,,具體比例可以參考文獻(xiàn))
稱取0.01g烘干樣本,加入1mL試劑一,,充分勻漿,;
80℃水浴提取30min,3000g,,25℃離心5min,,棄上清,留沉淀,;
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min,;3000g,25℃離心5min,,棄上清,,留沉淀;
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,,90℃水浴10min,,冷卻后3000g,25℃離心5min,,取上清待測(cè),。
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)雙波長(zhǎng)至550nm和485nm,,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取40μL 10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液,,加入960μL試劑四,,充分混勻,配制成0.4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液使用,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。(實(shí)驗(yàn)中每管需要20μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,,故配制大體積,。)
操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑) :
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本(µL) | 20 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL) | - | 20 | - |
蒸餾水(µL) | - | - | 20 |
試劑五(µL) | 4 | 4 | 4 |
試劑六(µL) | 4 | 4 | 4 |
蒸餾水(µL) | 172 | 172 | 172 |
充分混勻,,測(cè)定550nm和485nm處的吸光值,550nm下的測(cè)定管,、標(biāo)準(zhǔn)管,、空白管分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,,485nm下的分別記為A’測(cè)定,、A’標(biāo)準(zhǔn)和A’空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=(A測(cè)定-A空白)-(A’測(cè)定-A’空白),,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-(A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白),。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)1-2次。 |
反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測(cè)完成防止褪色,。
若A測(cè)定大于0.95,建議樣本上清用試劑四稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,;若A測(cè)定低于0.07時(shí),,可以提取時(shí)減少試劑四體積進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式,。
取0.01g烘干玉米于研缽中研碎,,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中,,80℃水浴提取30min,,3000g,25℃離心5min,,棄上清,,留沉淀,加入1mL試劑二(*)振蕩5min,,3000g,,25℃離心5min,棄上清,,留沉淀,,加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,,冷卻后3000g,,25℃離心5min,,取上清,之后按照測(cè)定步驟操作,,使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=(A測(cè)定-A空白)-(A’測(cè)定-A’空白)=(0.395-0.047)-(0.283-0.058)=0.123,,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-(A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)=(0.517-0.047)-(0.317-0.058)=0.211,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:直鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=2×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=116.59 mg/g 質(zhì)量,。
直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法 直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒 微量法
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