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木質(zhì)素含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動,，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC4205
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液配制：

1. 試劑三：自備，石 油 醚,，約需要35mL,。（石油 醚沸程：30～60℃）

2. 試劑四：該試劑具有強(qiáng)揮發(fā)性和一定的毒性，注意在通風(fēng)櫥操作并且每次用完用封口膜密封保存,。

3. 試劑五：試劑有腐蝕性,，注意防護(hù)。

產(chǎn)品說明：
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一,，具有使細(xì)胞相連的作用,。木質(zhì)素存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁,，為次生壁主要成分,。
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙酰化后在280nm處有特征吸收峰,，280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān),。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測,。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板（非聚苯乙烯材質(zhì)）,、可調(diào)式移液槍,、研缽、EP管,、封口膜,、冰乙酸、石油 醚,、30-50目篩和蒸餾水,。
操作步驟：
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
樣本80℃烘干至恒重，研磨,，過 30-50目篩,，稱取約3mg于1.5mLEP管中。
二,、測定步驟

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至280nm，分光光度計用冰乙酸調(diào)零,。

2. 操作表（在1.5mL離心管中依次加入下列試劑）：

乙?；?/span>

測定：（注：由于冰乙酸易揮發(fā),，請混勻后立即測定,！建議混勻一管測一管）

三,、木質(zhì)素含量計算
1、按微量石英比色皿計算：
木質(zhì)素含量（mg/g）=ΔA÷ε÷d×V檢測÷（V上清×W÷V乙?；?span style="font-family: Times New Roman, Times, serif;">=1.3105×ΔA÷W
木質(zhì)素的百分含量（%）=木質(zhì)素含量÷1000×100%=0.13105×ΔA÷W
V乙?；阂阴；磻?yīng)體積,，0.612mL,；ε：木質(zhì)素消光系數(shù)，23.35mL/mg/cm,；d：比色皿光徑,，1cm；V上清：上清液體積,，0.012mL,；V檢測：檢測體積，0.6mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；1000：換算系數(shù),，1g=1000mg,。
2、按96孔UV板進(jìn)行計算：
將上述公式中的d-1cm修改為d-0.6cm（96孔板光徑）進(jìn)行計算即可,。
注意事項：

1. 試劑四有毒性,，請操作時做好防護(hù)措施,，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出,。

2. 加熱過程中有劇烈反應(yīng),，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害,。

3. 冰乙酸具有強(qiáng)刺激性,，建議操作過程全部在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。

4. 取上清加冰乙酸步驟根據(jù)自己樣本乙?；潭?，冰乙酸的用量可調(diào)整，保證吸光值在0.1-0.8之間即可,，并在公式中參與計算,。

5. 由于冰乙酸具有揮發(fā)性，建議用比色皿進(jìn)行測定實(shí)驗(yàn),。實(shí)驗(yàn)混勻后必須立即測定,！

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Liang R, Zhao J, Li B, et al. Implantable and degradable antioxidant poly (ε-caprolactone)-lignin nanofiber

membrane for effective osteoarthritis treatment[J]. Biomaterials, 2020, 230: 119601.
參考文獻(xiàn)：
[1] Goldschmid O. Determination of phenolic hydroxyl content of lignin preparations by ultraviolet spectrophotometry[J]. Analytical Chemistry, 1954, 26(9): 1421-1423.
[2] Janshekar H, Brown C, Fiechter A. Determination of biodegraded lignin by ultraviolet spectrophotometry[J]. Analytica Chimica Acta, 1981, 130(1): 81-91.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2030/BC2035 異檸檬酸裂解酶（ICL）活性檢測檢測試劑盒
BC3170/BC3175 乙酸激酶（ACK）活性檢測試劑盒

木質(zhì)素含量檢測試劑盒 微量法 木質(zhì)素含量檢測試劑盒 微量法