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土壤脂肪酶（S-LPS）活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號(hào): BC3980
規(guī)格: 50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員,。

溶液的配制：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1.97 mL甲苯，即100 μmol/mL油酸,。用前注意解凍溶解,。用不完的試劑可以2-8℃保存一個(gè)月。

2. 工作液的配制：將試劑三臨用前加入20 mL蒸餾水于沸水浴中溶解,，2-8℃保存兩周,。冷卻至常溫后加入5 mL試劑二混合,，高速震蕩2次，每次3min,，間隔5min,。可根據(jù)該比例現(xiàn)用現(xiàn)配,。

產(chǎn)品說明：
脂肪酶（LPS）又稱甘油酯水解酶,，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。該酶在土壤生物動(dòng)力學(xué)中具有重要的作用,。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,，利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率，即可計(jì)算LPS活性,。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì),、1mL玻璃比色皿,、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器,、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、可調(diào)式移液槍、研缽,、甲苯（不可快遞）,、冰和蒸餾水、30-50目篩,。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
新鮮土樣自然風(fēng)干,，過30-50目篩,。
二、測(cè)定步驟

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至710nm,，甲苯調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：取50µL 100µmol/mL油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,，加入950µL甲苯,，充分混勻，配制成5µmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè),，現(xiàn)用現(xiàn)配,。（實(shí)驗(yàn)中每管需要1mL。）

1. 操作表：取2mL EP管,，加入下列試劑

取出離心管，小心吸取上層有機(jī)相1mL,，加入另一1.5mL EP管中,，按下表操作：

反復(fù)充分震蕩混勻；室溫4000rpm離心10min,，小心吸取上層有機(jī)相溶液800μL,，加入1mL玻璃比色皿，于710nm處測(cè)定吸光值,。記為A對(duì)照管,、A測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管,、A空白管,，計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,?？瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只需做1-2次。

注意事項(xiàng)：
1,、甲苯有毒，實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩,。
2,、實(shí)驗(yàn)過程中須遠(yuǎn)離火源。
3,、當(dāng)吸光度大于0.8時(shí),，建議將樣本稀釋后測(cè)量（第二次加入甲苯的量增加）。
4,、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材質(zhì),。

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