目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC3085-100T/48S土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
貨號 | BC3085 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒 |
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)活性
檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,,請注意并嚴格按照該說明書操作,。
貨號:BC3085
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員,。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體0.5mL×1支(自備) | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑一:自備甲苯,,2-8℃保存;
試劑二:臨用前取1瓶加入5 mL蒸餾水,,充分溶解備用,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,;
標準品:5 mmol/L的對硝 基苯* 溶液,。
產(chǎn)品說明:
S-α-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,,在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能,。
S-α-GC能夠催化對-硝 基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝 基苯*,后者在400nm有特征光吸收,。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗,。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀,、臺式離心機,、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、可調(diào)式移液器,、微量玻璃比色皿/96孔板,、30-50目篩、研缽,、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水,。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,,具體比例可參考文獻)
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,,過30-50目篩。
二,、測定步驟
分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min,,調(diào)節(jié)波長至400nm,,分光光度計蒸餾水調(diào)零。
標準品:取20μL 5mmol/L的對硝基 苯 * 溶液,,加入980μL蒸餾水,,充分混勻,配制成100μmol/L標準液使用,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。(實驗中每管需要100μL,為減小實驗誤差,,故配制大體積,。)
加樣表:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標準管 | 空白管 |
風(fēng)干土樣(g) | 0.02 | 0.02 | - | - |
試劑一(μL) | 5 | 5 | - | - |
振蕩混勻,使土樣潤濕,,室溫放置15min | - | - | ||
試劑二(μL) | 80 | - | - | - |
試劑三(μL) | 100 | 100 | - | - |
混勻,, 37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(蓋緊,,防止水分散失),,流水/冰浴冷卻。 | - | - | ||
試劑二(μL) | - | 80 | - | - |
10000rpm 25℃離心10min,,取上清液 | - | - | ||
上清液(μL) | 100 | 100 | - | - |
標準品(μL) | - | - | 100 | - |
蒸餾水(μL) | - | - | 100 | |
試劑四(μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
充分混勻,,常溫靜置2min 后,測定吸光值A,,分別記為A測定管,、A對照管、A標準管,、A空白管,。計算ΔA=A 測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A空白管,。每個測定管設(shè)一個對照管,。標準管和空白管只需做1-2次
三、S-α-GC 活力計算
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol對-硝 基苯*定義為一個酶活力單位,。
S-α-GC活力(U/g 土樣)=ΔA÷ (ΔA標準÷C標準)×V反總÷W÷T=0.444×ΔA÷ΔA標準÷W
T:反應(yīng)時間,,1h=1/24d;V反總:反應(yīng)體系總體積:1.85×10-4L,;C標準:標準溶液濃度,,100μmol/L;W:樣本質(zhì)量,,g,。
注意事項:
若ΔA<0.01,可延長37℃水浴時間,;若ΔA>1.5,,可將上清液稀釋后進行測定,;最后計算時注意各個因素的改變。
實驗實例:
取兩管0.02g三葉草土,,即為測定管和對照管,,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.421-0.238=0.183,,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.473-0.047=0.426,,計算酶活得:
S-α-GC活力(U/g 土樣)=0.444×ΔA÷ΔA標準÷W=0.444×0.183÷ 0.426÷0.02=9.5366 U/g 土樣。
取兩管0.02g林土樣,,即為測定管和對照管,,按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.374-0.225=0.149,,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.473-0.047=0.426,,計算酶活得:
S-α-GC活力(U/g 土樣)=0.444×ΔA÷ΔA標準÷W=0.444×0.149÷ 0.426÷0.02=7.7648 U/g 土樣。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0160/BC0165 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β- GC)活性檢測試劑盒
BC4040/BC4045 土壤中性轉(zhuǎn)化酶(S-NI)活性檢測試劑盒
BC0240/BC0245 土壤蔗糖酶(S-SC)活性檢測試劑盒
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒 土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒